【摘 要】
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目的 探究慢病毒介导HO-1过表达载体转染BMSCs对2型糖尿病肾病大鼠模型的保护作用.方法 以鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs)为研究对象,流式细胞仪鉴定BMSCs,构建糖尿病肾病大鼠模型,根据实验目的,将SD大鼠分成3组,其中干预组大鼠构建DN模型成功后,通过尾静脉注射HO-1过表达载体修饰的BMSCs,模型组大鼠构建DN模型后,尾静脉注射等量PBS溶液.利用HE染色,透射电镜染色观察肾小球基底膜情况,TUNEL染色检测细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学染色检测HO-1基因和凋亡相关因子Caspas
【机 构】
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青岛大学附属医院内分泌科,山东青岛266003;青岛大学附属医院崂山院区心内科,山东青岛266003;青岛大学附属医院心血管外科,山东青岛266003
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目的 探究慢病毒介导HO-1过表达载体转染BMSCs对2型糖尿病肾病大鼠模型的保护作用.方法 以鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs)为研究对象,流式细胞仪鉴定BMSCs,构建糖尿病肾病大鼠模型,根据实验目的,将SD大鼠分成3组,其中干预组大鼠构建DN模型成功后,通过尾静脉注射HO-1过表达载体修饰的BMSCs,模型组大鼠构建DN模型后,尾静脉注射等量PBS溶液.利用HE染色,透射电镜染色观察肾小球基底膜情况,TUNEL染色检测细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学染色检测HO-1基因和凋亡相关因子Caspase-6和Caspase-3的表达.结果P2代鼠源BMSCs细胞表面的CD44和CD29的表达阳性率分别为60.2％和58.3％,CD34和CD45分别为3.4％和2.6％.干预组大鼠肾脏肾小球较为规则,系膜细胞浸润明显低于模型组,肾脏基底膜较为清晰,系膜增生不明显,干预组凋亡细胞数较模型组明显减少,干预组HO-1,Caspase-6和Caspase-3的表达量要明显高于模型组.结论 HO-1基因过表达载体转染BMSCs抑制Caspase-3的表达,从而抑制细胞的凋亡,保护肾小球基底膜,对DN大鼠有一定的保护作用.
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