论文部分内容阅读
目的 研究阿魏酸对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的保护作用及其可能的机制。方法 将雄性SD大鼠采用随机数字表法分为四组（n=12）：假手术组（Sham组），I/R模型组（I/R组）；阿魏酸+I/R组（Fer+I/R组）；阿魏酸+蛋白激酶抑制剂（LY294002）+I/R组（Fer+LY+I/R）。通过结扎左冠状动脉前降支30 min，然后再灌注2 h，建立I/R损伤大鼠模型。通过苏木精-伊红（HE）染色分析大鼠的左心室病理学变化，结合透射电子显微镜观察其超微结构；通过TUNEL/DAPI双重染色检测大鼠心肌细胞凋亡率。通过蛋白质印迹法（Western blotting）检测PI3K/Akt信号通路关键调控因子的蛋白表达水平[包括PI3K、p-Akt（Ser 473）、Akt、eNOS、p-eNOS（Ser1177）和p-mTOR（Ser2448）]，以及血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和IL-1β水平。结果 HE染色结果显示，相较于假手术组，I/R组大鼠心肌中表现出明显的炎性细胞浸润、细胞膜损伤、细胞坏死和水肿；而Fer+I/R组大鼠表现心肌细胞坏死、炎性细胞浸润，细胞水肿均明显低于I/R组，并且心肌纤维结构清晰完整。TUNEL/DAPI双重染色结果显示，Fer+I/R组大鼠[（18.73±1.01）%]心肌细胞凋亡率明显低于I/R组[（55.45±1.14）%]（P＜0.001）。Western blotting检测结果表明，与I/R组相比，Fer+I/R组大鼠Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,PI3K、p-Akt、Akt、p-eNOS（Ser1177）和p-mTOR（Ser2448）蛋白表达明显上调（P＜0.05）。相较于I/R组，阿魏酸显著抑制MDA5、TNF-α、IL-6和IL-1β的表达（P＜0.05），并上调SOD1蛋白表达水平（P＜0.05）；而LY294002处理逆转了阿魏酸在I/R模型大鼠中对上述细胞因子的调控作用。结论 阿魏酸通过激活PI3K/Akt信号通路抑制心肌细胞凋亡，减轻炎症反应和氧化应激水平，保护大鼠免受缺血/再灌注诱导的心肌损伤。