目的 结合网络药理学研究方法，探讨化滞柔肝颗粒（HZRG）减轻非酒精性脂肪性肝炎（NASH）相关肝纤维化的作用机制。方法 借助网络药理学分析聚焦HZRG治疗NASH的潜在靶点。将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和HZRG低、高剂量组，每组8只。除对照组外，其余各组小鼠给予蛋氨酸胆碱缺乏饮食诱导NASH相关纤维化模型，造模的同时给予相应药物干预，连续4周。HE染色观察肝组织病理变化，并行非酒精性脂肪性肝病活动度评分（NAS）；天狼猩红和Masson染色法观察肝脏胶原沉积情况；免疫组化法观察肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白α1链（Col1a1）的表达情况，并用ImageJ软件分析阳性表达面积。试剂盒检测肝组织总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。采用生化分析仪检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）水平，ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。Western blot法和免疫荧光法检测α-SMA、Col1a1、p53蛋白表达水平；RT-qPCR法检测p53 mRNA相对表达量。不同浓度转化生长因子-β1（TGF-β1）或Tenovin-6处理人源性肝星状细胞系LX2细胞24 h，检测相关指标。结果 （1）网络药理学研究结果提示，p53是HZRG发挥效应的潜在靶点。（2）HE染色、Masson染色和天狼猩红染色结果显示，模型组小鼠肝脏脂质累积、炎细胞浸润、纤维化形成，与对照组比较，模型组小鼠肝组织病理α-SMA、Col1a1阳性表达面积增加（P＜0.05）,NAS评分升高（P＜0.05）;HZRG低、高剂量组小鼠肝细胞内脂滴减少，肝脏脂肪变和炎细胞浸润程度明显减轻，与模型组比较，HZRG低、高剂量组肝组织病理α-SMA、Col1a1阳性表达面积减少（P＜0.05）,NAS评分降低（P＜0.05）。（3）与对照组比较，模型组小鼠血清ALT、AST、LDH、ALP水平升高（P＜0.05）；与模型组比较，HZRG低、高剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH、TNF-α水平降低（P＜0.05）,HZRG低剂量组小鼠血清ALP水平降低（P＜0.05）。（4）与对照组比较，模型组小鼠肝组织TG、α-SMA蛋白水平升高（P＜0.05）；与模型组比较，HZRG高剂量组小鼠肝组织α-SMA蛋白水平降低（P＜0.05）,HZRG低、高剂量组小鼠肝组织TG、Col1a1蛋白水平降低（P＜0.05）。（5）各组小鼠肝组织p53 mRNA表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（6）p53蛋白在NASH小鼠肝组织及活化的LX2细胞中表达降低，HZRG及Tenovin-6可上调其表达；p53蛋白表达升高，可缓解NASH小鼠肝组织纤维化进展、抑制LX2细胞活化。结论 HZRG减轻NASH相关肝纤维化的机制可能与上调p53蛋白表达有关。