【摘 要】
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目的 构建人前脑啡肽原(PENK)基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系(hMSCs).方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒(pBABE-PENK)转染至Phoenix-293T细胞,收集病毒上清液感染hMSCs细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定表达PENK基因的hMSCs细胞株(hMSC-PENK细胞).以转染空载体细胞作为对照,即hMSC-pBABE细胞.采用RT-P
【机 构】
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汕头市中心医院麻醉科,510080,广州市,广东省人民医院麻醉科,广东省医学科学院,510080,广州市,广东省人民医院麻醉科,广东省医学科学院
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目的 构建人前脑啡肽原(PENK)基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系(hMSCs).方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒(pBABE-PENK)转染至Phoenix-293T细胞,收集病毒上清液感染hMSCs细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定表达PENK基因的hMSCs细胞株(hMSC-PENK细胞).以转染空载体细胞作为对照,即hMSC-pBABE细胞.采用RT-PCR法检测PENK mRNA的表达,免疫荧光法测定亮氨酸脑啡肽(LEK)的表达,ELISA法测定细胞培养上清液LEK浓度.结果 与hMSCs细胞和hMSC-pBABE细胞比较,hMSC-PENK细胞PENK mRNA和LEK表达上调,细胞培养上清液中LEK浓度升高(P＜0.05或0.01).结论 PENK基因修饰的hMSCs可表达PENK基因并分泌脑啡肽蛋白,成功构建了稳定分泌镇痛物质的细胞系。
其他文献
目的 评价加巴喷丁对神经病理性痛大鼠背根神经节神经元高电压激活钙电流的影响.方法 雄性SD大鼠,周龄4～6周,采用结扎L_5脊神经的方法建立神经病理性痛模型.于术后14 d时采用酶消化法急性分离损伤侧L_5背根神经节神经元,采用全细胞膜片钳技术记录神经元高电压激活钙电流,记录加巴喷丁0.1、1、10、100、300 μmol/L(G_(1～5)组)作用下的钙电流,计算电流抑制率;并绘制100 μm
2009年刚刚过去,我们迎来了新世纪的第二个10年.回顾中国麻醉学科在2009年的发展,我们仍然难以平息激动的心情.2009年,是新中国成立60周年纪念的日子,也是新中国麻醉学事业奠基60周年、中华医学会麻醉学分会成立30周年、麻醉学科从大外科独立成为真正临床学科20周年的大喜的日子.这么多值得纪念的日子汇聚在一起,使得2009年在中国麻醉学界工作者心目中留下了终生难忘的美好记忆.
目的 确定不同潮气量通气患者液体治疗时每搏量变异度（SVV）判断扩容效应的阈值。方法拟在全麻下行胃肠手术的患者50例，ASA分级I或Ⅱ级，年龄20～75岁，随机分为2组（n=25）：潮气量8ml／kg组（v1组）和潮气量10ml／kg组（V2组）。麻醉诱导后以0．4m1．kg-1·min-1的速率静脉输注6％羟乙基淀粉130／0．4氯化钠注射液，输注量7ml／kg。于液体治疗前即刻（L）和液体治疗
目的 探讨O位-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)表达中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),正常对照组(C组)仅静脉输注乳酸钠林格氏液;LPS组、G+LPS组和A+G+LPS组均静脉注射LPS10 mg/kg,G+LPS组给予LPS前1 h静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,A+G+LPS组给予LPS前1
目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对新生大鼠内毒索性急性肺损伤时NF-kB活性的影响.方法 健康新生Wistar大鼠30只,雌雄不拘,日龄7 d,体重18～21 g,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素3 mg/kg的方法制备急性肺损伤模型,P组腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.5 mg/kg,30 min后制备模型,C组腹腔注射
本课题组前期研究结果表明,大鼠小肠缺血再灌注可诱发视网膜损伤[1].研究表明,异丙酚可减轻心脏、脑缺血再灌注损伤[2-3],其对肠缺血再灌注诱发视网膜损伤的影响尚未定论.本研究拟探讨异丙酚对大鼠肠缺血再灌注诱发视网膜损伤的影响。
患者,女性,31岁,孕35周,合并艾森曼格综合征(动脉导管未闭合并肺动脉高压),因活动后胸闷气短,BP升高10 d入院.术前检查:发绀,BP 155/120 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),HR 102次/min,杵状指趾,呼吸音粗,NYHA分级IV级,心脏听诊闻及左第2肋间3级双期杂音。
目的 评价异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ca2＋诱发神经元线粒体损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠84只，体重250～300g，随机分为4组（n=21），假手术组（S组）仅暴露颈内动脉但不结扎颈总动脉；缺血再灌注组（IR组）、CaCl3组和异丙酚组（P组）采用结扎颈总动脉的方法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，缺血2h，再灌注24h。缺血2h时进行神经功能缺陷评分。再灌注24h时处死大鼠，分
异丙酚静脉麻醉是经阴道B超引导下穿刺取卵术的主要麻醉方法[1-3].实验研究显示,大鼠卵母细胞在含高浓度异丙酚(10μg/ml)中孵育30 min时,成熟率降低[4];在含异丙酚浓度≥0.4 μg/ml的培养液中孵育60 min后,卵母细胞受精融合率降低[5].本研究拟观察取卵术患者异丙酚静脉麻醉时卵泡液异丙酚浓度的变化,为异丙酚用于经阴道穿刺取卵术静脉麻醉的安全性研究提供依据。
目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在七氟烷预处理抑制大鼠氧糖剥夺海马神经元凋亡中的作用.方法 出生48 h内的Wistar大鼠,体外培养海马神经元,随机分为6组,每组108孔,正常对照组(C组):不做任何处理;2%七氟烷预处理组(S1组):2%七氟烷预处理60 min后正常培养24 h;OGD组:缺糖缺氧45 min后复糖复氧,再正常培养24 h以制备氧糖剥夺模型;2%七氟烷预处理+OGD 组