【摘 要】
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为探索利用CIITA(MHC classⅡtransactivator)基因反义RNA抑制MHC Ⅱ类分子表达的可能性,为CIITA的应用研究奠定基础.利用RT-PCR扩增能与CIITA cDNA第95至500 bp互补的片段,
【机 构】
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上海第二医科大学,福建医科大学附属第一医院检验科
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为探索利用CIITA(MHC classⅡtransactivator)基因反义RNA抑制MHC Ⅱ类分子表达的可能性,为CIITA的应用研究奠定基础.利用RT-PCR扩增能与CIITA cDNA第95至500 bp互补的片段,并构建成pcDNA3/CIITAa重组质粒,脂质体转染法将其转入人HeLa/Raji细胞和猪PIEC/L23细胞,流式细胞术动态检测反义RNA对人/猪MHCII类分子的抑制率和抑制程度.结果显示HeLa、Raji、PIEC和L23四种细胞MHCⅡ类分子受抑制率分别为46.7%(7/15),40%(6/15),46.7%(7/15)和33.3%(5/15).典型受抑克隆细胞MHCⅡ类分子受抑程度高达85%,反义RNA对MHC Ⅱ类分子的抑制时间持续35～50 d.CIITA反义RNA能有效抑制人/猪MHC Ⅱ类分子的表达,它在自身免疫和移植免疫中有一定的应用前景.
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