【摘 要】
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目的探讨大鼠耳蜗基底膜毛细胞活性鉴别的实验观察方法。方法采用丫啶橙-碘化丙啶(acri-dine orange-propidiumiodide,AO/PI)双染色法,荧光显微镜观察,检测经组织培养后新生
【机 构】
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武警医学院附属医院耳鼻咽喉科,解放军总医院耳鼻咽喉研究所,沈阳军区总医院耳鼻咽喉科
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目的探讨大鼠耳蜗基底膜毛细胞活性鉴别的实验观察方法。方法采用丫啶橙-碘化丙啶(acri-dine orange-propidiumiodide,AO/PI)双染色法,荧光显微镜观察,检测经组织培养后新生大鼠耳蜗基底膜毛细胞的活性。结果在激发光下染色后的活细胞核是亮绿色,失活细胞核呈橙红色。当染液pH为6.5,AO浓度为0.1‰时,细胞染色不足,浓度超过1.5‰时,出现“过染”,最适染色浓度为1‰;当1‰AO的pH值低于5.0时毛细胞蒙上红晕,背景模糊,当pH值高于7.4时,不能区分死亡细胞与活细胞,pH值6.5~7.0时,染色效果最好。结论用pH为6.8的1‰AO、0.1‰PI染色,可清晰分辨死/活细胞。
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