红芪多糖对高糖培养下雪旺细胞Bcl-2/Caspase-3信号通路的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhzzmm
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目的:通过观察红芪多糖(HPS)对高糖培养下雪旺细胞(SCs)B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)信号通路的影响,探讨HPS在治疗糖尿病周围神经病变(DPN)过程中可能的作用机制。方法:选取出生5~7 d的SD乳鼠4只,随机分为正常组、高糖组、HPS+高糖组、α-硫辛酸(α-LA)+高糖组,从坐骨神经部位提取SCs,放入37℃,5%CO2培养箱中培养,待细胞达整瓶的80%后,细胞增殖与活性检测(CCK-8)法筛适宜高糖,HPS及α-LA干预的实验浓度,蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与mRNA的表达情况,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法流式细胞术检测各组SCs的凋亡率。结果:Western blot,Real-time PCR检测结果显示,与正常组比较,高糖组Bcl-2蛋白及mRNA表达水平降低,Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组比较,HPS+高糖组、α-LA+高糖组的Bcl-2蛋白及mRNA表达水平明显升高,Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Annexin V/PI法流式细胞术检测结果显示,与正常组比较,高糖组SCs凋亡率明显增加;与高糖组比较,HPS+高糖组和α-LA+高糖组SCs凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HPS可以减轻SCs凋亡反应状态,其作用机制可能与抑制Bcl-2/Caspase-3信号通路激活有关。
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