【摘 要】
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BIN2是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在油菜素内酯（BR）信号转导中发挥重要作用。为了获得具有激酶活性且不带标签的BIN2蛋白,将BIN2基因构建到带eXact标签的pPAL8表达载体上,获得
【机 构】
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华北理工大学生命科学学院基因组学与计算生物学研究中心,河北师范大学生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31401212,31201063）, 河北省自然科学基金（C2014209134,C2012205042）
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BIN2是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在油菜素内酯（BR）信号转导中发挥重要作用。为了获得具有激酶活性且不带标签的BIN2蛋白,将BIN2基因构建到带eXact标签的pPAL8表达载体上,获得BIN2基因的原核表达载体eXact-BIN2,转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3）。摸索合适的诱导条件后成功诱导出51 kD的eXact-BIN2蛋白。经eXact纯化介质纯化并切除标签,获得质量较高、不带标签的BIN2蛋白。该BIN2蛋白具有较高的激酶活性,能够在体外磷酸化MBP-BZR1蛋白。
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