二仙汤对过氧化氢诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的保护作用

来源 :中国中西医结合杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdasda168
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目的 探讨二仙汤对过氧化氢(H2O2)诱导人卵巢颗粒细胞(COV434)氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法 体外培养COV434细胞,0.5 mmol/L H2O2诱导COV434氧化损伤。将细胞分为空白组、模型组(H2O20.5 mmol/L)、二仙汤水提液低、中、高剂量组(0.5、1、5 mg/mL+H2O2 0.5 mmol/L)。MTT分析细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧族(ROS)水平,微量酶标法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放。Annexin V-FITC/PI双染和PI染色,分别检测细胞凋亡和周期。Western blot检测HO-1、NQO-1、P-JNK、P-44/42、P-p38、Bax、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组细胞存活率下降,ROS及LDH水平增加,S期百分率、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡比例显著增高(P<0.01),Bax、Caspase-9及P-JNK蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,二仙汤水提液低、中、高剂量组LDH、S期百分率降低,G2/M期百分率升高(P<0. 05),二仙汤水提液中、高剂量组细胞存活率升高,ROS释放量、早期凋亡及总凋亡比例降低(P<0. 05,P<0. 01),二仙汤水提液低、中剂量组P-44/42蛋白表达升高(P<0.05)。结论 二仙汤在一定剂量范围内对H2O2诱导的COV434细胞损伤具有明显的保护作用,其保护效应可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,调控MAPK-Nrf2信号通路及线粒体通路介导的细胞凋亡有关。
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