【摘 要】
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目的 研究一种去除血清外泌体( exosomes, Exos)的超离方法,以及去外泌体血清对脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)和肿瘤细胞(胃癌细胞)的增殖、衰老、周期和凋亡的影响,为用于外泌体机制研究的细胞培养方法提供新方案.方法 超离法去除胎牛血清中的外泌体,Western印迹法检测外泌体的去除效果,使用去外泌体血清作为实验组以及正常血清作为对照组配置培养基,对培养的脂肪干细胞和肿瘤细胞用CCK-8法分析细胞生长情况,β-Gal半乳糖苷酶染色法分析细胞衰老情
【机 构】
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同济大学医学院,上海 200092
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目的 研究一种去除血清外泌体( exosomes, Exos)的超离方法,以及去外泌体血清对脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)和肿瘤细胞(胃癌细胞)的增殖、衰老、周期和凋亡的影响,为用于外泌体机制研究的细胞培养方法提供新方案.方法 超离法去除胎牛血清中的外泌体,Western印迹法检测外泌体的去除效果,使用去外泌体血清作为实验组以及正常血清作为对照组配置培养基,对培养的脂肪干细胞和肿瘤细胞用CCK-8法分析细胞生长情况,β-Gal半乳糖苷酶染色法分析细胞衰老情况,流式细胞分析法检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 Western印迹法结果显示超离法能高效去除血清中外泌体,对培养的细胞检测分析显示实验组ADSCs增殖减慢,细胞周期,衰老和凋亡均无明显变化.实验组肿瘤细胞的增殖、衰老、细胞周期、凋亡均不存在显著性差异.结论 超离法能有效去除血清外泌体对ADSCs和肿瘤细胞外泌体研究的干扰,且对细胞不产生影响.
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