【摘 要】
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背景:间充质干细胞如今在科研领域被广泛地研究和应用,许多研究认为其发挥作用的机制很大程度上依赖于其旁分泌的外泌体。目的:分离纯化人脂肪干细胞来源的外泌体,并鉴定其生
【基金项目】
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南京军区医学创新重大课题(14ZX01);中国肝炎防治基金会-天晴肝病研究基金资助课题(TQGB20150104)~~
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背景:间充质干细胞如今在科研领域被广泛地研究和应用,许多研究认为其发挥作用的机制很大程度上依赖于其旁分泌的外泌体。目的:分离纯化人脂肪干细胞来源的外泌体,并鉴定其生物学特性。方法:采用胶原酶消化法获得人脂肪干细胞,进行细胞表面分子标志和成骨、成脂分化能力鉴定。运用超滤法从人脂肪干细胞条件培养基中提取外泌体,应用扫描电子显微镜、粒度仪观察所获外泌体的形态和大小,采用抗体芯片检测外泌体所含蛋白质表达。结果与结论:(1)人脂肪干细胞呈梭形、漩涡状生长,细胞表面表达CD73、CD44、CD90、CD105分子,具备成脂、成骨等多向分化潜能,可证实为人脂肪干细胞;(2)大多数外泌体直径均在30-150 nm范围内;扫描电镜显示外泌体呈均一大小的圆杯形态;(3)抗体芯片显示外泌体含FLOT1、ICAM、ALIX、CD81、CD63、ANXA5、TSG101等多种特殊蛋白;(4)以上结果表明实验成功分离得到人脂肪干细胞外泌体。
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