G蛋白Rab3acDNA的克隆与表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhaochunguang741

【摘要】

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利用PCR法，从人胎盘总cDNA中扩增得到Rab3acDNA的全编码区，序列分析表明，扩增得到的Rab3acDNA有5个核苷酸发生了变异，但翻译的氨基酸与发表的完全一致，将扩增得到的Rab3acDNA克隆

【作者】

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康巧华陈巧林等

【机构】

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北京大学生命科学学院蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,扬州大学畜牧兽医学院

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

G蛋白 RAB3A 克隆表达谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析 Gprotein Rab3a cloning andexpression Glu

【基金项目】

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国家 95攻关合同项目资助 (No .96C0 20 1 0 9)

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利用PCR法，从人胎盘总cDNA中扩增得到Rab3acDNA的全编码区，序列分析表明，扩增得到的Rab3acDNA有5个核苷酸发生了变异，但翻译的氨基酸与发表的完全一致，将扩增得到的Rab3acDNA克隆于原核融合表达载体pGEX-4T-1中，在E.coliBL21中经IPTG诱导表达，为了进一步鉴定表达产物，对纯化后的Rab3a蛋白进行了SDS-PAGE、N端氨基酸测序，质谱分子量测定及氨基酸组成分析鉴定，结果显示，表达蛋白的分子量约25kD，N端氨基酸序列为MASATDSR，氨基酸组成分析表明，Rab

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