【摘 要】
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目的 观察微小核糖核酸-18a(miR-18a)靶向WNT家族成员2B(WNT2B)对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 于2019年10月至2020年3月研究miR-18a靶向WNT2B对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响;子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织收集自延安市人民医院;在子宫肌瘤细胞中转染miR-18a模拟物(miR-18a mimics),qRT-PCR方法检测miR-18a表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定细胞增殖,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检
【机 构】
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延安市人民医院妇产科,陕西 延安716000
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目的 观察微小核糖核酸-18a(miR-18a)靶向WNT家族成员2B(WNT2B)对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 于2019年10月至2020年3月研究miR-18a靶向WNT2B对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响;子宫肌瘤组织和正常子宫肌组织收集自延安市人民医院;在子宫肌瘤细胞中转染miR-18a模拟物(miR-18a mimics),qRT-PCR方法检测miR-18a表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定细胞增殖,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期数依赖性蛋白激酶4(CDK4)、B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达变化.利用荧光素酶报告系统鉴定miR-18a与WNT2B的靶向关系.将WNT2B过表达载体与miR-18a mimics共转染到子宫肌瘤细胞中,同样利用上述方法测定细胞增殖、周期以及凋亡变化.结果 与正常子宫肌细胞(1.00±0.10)比较,子宫肌瘤细胞中miR-18a表达水平(0.52±0.06)下降;与miR-NC组(0.97±0.13)比较,转染miR-18a mimics后的子宫肌瘤细胞中miR-18a表达水平(3.21±0.25)升高,细胞增殖能力[A值(0.44±0.06)比(0.26±0.03)]下降,细胞G1期比例[(57.15±6.94)％比(72.21±4.15)％]升高,细胞凋亡率[(6.38±0.41)％比(25.21±2.10)％]也升高,细胞中cyclin D1[(0.50±0.05)比(0.20±0.02)]、CDK4[(0.54±0.06)比(0.29±0.04)]、Bcl-2[(0.66±0.07)比(0.42±0.05)]蛋白表达水平下降,Bax[(0.47±0.05)比(0.82±0.09)]蛋白表达水平升高.miR-18a靶向抑制子宫肌瘤细胞中WNT2B的表达.WNT2B过表达载体提高上调miR-18a的子宫肌瘤细胞增殖能力,降低细胞G1期比例,减少细胞凋亡.结论 miR-18a靶向抑制WNT2B表达降低子宫肌瘤细胞增殖能力并诱导细胞凋亡.
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