研究大豆蛋白水解物对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞生长和流感病毒增殖的促进作用。
方法比较MDCK细胞在10%进口胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)-Dulbecco改良Eagle培养基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium,DMEM),10%国产新生牛血清(newborn calf serum,NCS)-DMEM和添加2、4、8 g/L大豆蛋白水解物SHEFF-VAX PLUS PF ACF(PF ACF)的10%国产NCS -DMEM中的生长情况,以及甲型H7N9流感病毒接种细胞后的血凝素(hemagglutinin,HA)效价。
结果采用培养瓶静置培养时,5种培养体系中的细胞数在第3天达到最高,分别为(8.67±1.54)×106、(4.78±0.64)×106、(10.60±0.23)×106、(9.17±0.51)×106和(4.79±0.19)×106。采用搅拌瓶内微载体培养时,FBS-DMEM、NCS-DMEM和添加2、4 g/L PF ACF的NCS-DMEM中的细胞密度最高可达到(2.56±0.68)×106、(1.93±1.85)×106、(2.20±1.48)×106和(2.50±1.25)×106细胞/ml。流感病毒接种细胞后,FBS-DMEM、NCS-DMEM和添加4 g/L PF ACF的NCS-DMEM中测得的病毒HA效价分别为8.0、3.5和8.0 log2HAU/50 μl。
结论含国产NCS的培养基在添加4 g/L PF ACF后,MDCK细胞密度和流感病毒产量与含进口FBS的培养基的培养结果相仿,因此,大豆蛋白水解物可作为培养基添加物应用于MDCK细胞培养和流感病毒增殖。