【摘 要】
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目的：构建小鼠血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）基因真核表达质粒,了解该质粒是否能在真核细胞中有效表达。方法：以小鼠胚肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1全段基因cDNA,应
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.30460050）、教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-0757）、海南省教育厅科研基金（Hjkj200422）
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目的：构建小鼠血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）基因真核表达质粒,了解该质粒是否能在真核细胞中有效表达。方法：以小鼠胚肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1（＋）真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染CHO细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果：成功扩增了小鼠VCAM-1全长基因cD
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