目的 检测普通急性淋巴细胞白血病(common-ALL)患儿中微小RNA(miRNA,miR)的差异性表达,并探讨miR-708的调控机制.方法研究对象为34例common-ALL患儿及5例行骨关节病手术并排除肿瘤和血液系统疾病患儿的骨髓标本.应用微阵列基因芯片技术筛选common-ALL患儿样本中差异性表达的miRNA,应用茎环状逆转录引物的stem-loop实时荧光定量PCR技术进行验证.应用生物信息学预测、双报告基因检测、RT-PCR和Westernblot等方法验证miR-708调控的靶基因及其表达.结果 在common-ALL患儿样本中检测的2006个miRNA中,miR-708、miR-181b和miR-210表达量分别为16.886±16.854、5.710±4.652和9.789±1.178,与正常对照组(1.872±0.339、1.276±0.531和1.005±0.080)相比表达均上调,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-27a和miR-345表达量为0.524±0.085和0.675±0.086,与正常对照组(1.123±0.066和1.204±0.140)相比均下调,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-708和miR-181b在高危组中表达水平为44.990±6.379和12.980±1.889,高于中危组和标危组(P<0.05).转染miR-708模拟物的人胚胎细胞株中CNTFR、NNAT和GNG12的表达水平均下降,而转染miR-708抑制剂组其表达升高.miR-708与CNTFR的结合区域位于3′-UTR端394~400bp.结论 miRNA在调控儿童common-ALL发生发展的过程中发挥重要的作用,其中miR-708是高危型common-ALL重要的调控因子.miR-708通过结合靶基因的3′-UTR端,降低其靶基因表达水平。
miR-708在儿童普通急性淋巴细胞白血病中的表达及调控机制
【摘 要】
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目的 检测普通急性淋巴细胞白血病(common-ALL)患儿中微小RNA(miRNA,miR)的差异性表达,并探讨miR-708的调控机制.方法研究对象为34例common-ALL患儿及5例行骨关节病手术并排除肿瘤和血液系统疾病患儿的骨髓标本.应用微阵列基因芯片技术筛选common-ALL患儿样本中差异性表达的miRNA,应用茎环状逆转录引物的stem-loop实时荧光定量PCR技术进行验证.应用
【机 构】
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250012,济南,山东大学齐鲁医院儿科、低温医学研究室,250012,济南,山东大学齐鲁医院儿科、低温医学研究室,250012,济南,山东大学齐鲁医院儿科、低温医学研究室,250012,济南,山东大
【出 处】
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中华血液学杂志
【发表日期】
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2013年34期
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