【摘 要】
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目的 探究组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化中的作用及机制.方法 首先,根据随机数表法将20只雄性C57BL/6小鼠分为Sham组和ISO组,每组10只.采用Western blot和免疫组织化学染色法检测两组小鼠心肌组织中HDAC3的蛋白表达状况.为进一步探讨HDAC3对小鼠心肌纤维化的表型影响及潜在机制,后续将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、RGFP966组、ISO组、ISO+RGFP966组,每组10只.采用ISO皮下多点注射的方式构建小鼠心
【机 构】
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恩施土家族苗族自治州中心医院心血管内科,湖北 恩施 445000
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目的 探究组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化中的作用及机制.方法 首先,根据随机数表法将20只雄性C57BL/6小鼠分为Sham组和ISO组,每组10只.采用Western blot和免疫组织化学染色法检测两组小鼠心肌组织中HDAC3的蛋白表达状况.为进一步探讨HDAC3对小鼠心肌纤维化的表型影响及潜在机制,后续将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、RGFP966组、ISO组、ISO+RGFP966组,每组10只.采用ISO皮下多点注射的方式构建小鼠心肌纤维化模型,分别采用HDAC3特异性抑制剂RGFP966干预,二维心脏超声检测小鼠心脏功能参数,包括射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)、左室收缩末期内径(LVESD)和左室舒张末期内径(LVEDD);马松染色观察各组小鼠心肌纤维化状况;实时荧光定量PCR检测各组小鼠心肌组织中胶原蛋白1、胶原蛋白3及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达水平;最后,Western blot检测Klotho及促纤维化相关信号分子的蛋白表达水平.结果 ISO组小鼠心肌组织中HDAC3蛋白相对表达量较Sham组的明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析,与Sham组比较,ISO组小鼠射血分数明显降低、短轴缩短率明显降低、左室舒张末期内径和左室收缩末期内径明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与Sham组比较,ISO组小鼠心肌组织胶原沉积明显增多、CollagenⅢ及CTGF的mRNA含量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与Sham组比较,ISO组小鼠心肌组织中Klotho蛋白表达明显降低、P-Smad和α-SMA的蛋白表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与ISO组比较,ISO+RGFP966组小鼠的射血分数明显增加、短轴缩短率明显增加、左室舒张末期内径和左室收缩末期内径明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与ISO组比较,ISO+RGFP966组小鼠心肌组织胶原沉积明显降低、CollagenⅠ、CollagenⅢ及CTGF的mRNA含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);心肌组织中Klotho蛋白表达明显升高、P-Smad3和α-SMA的蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 心肌纤维化时,心肌组织HDAC3的蛋白表达水平明显增加,抑制HDAC3可通过上调Klotho改善心肌纤维化.
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