【摘 要】
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目的 通过电针干预GDNF基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤,探讨其能否对Notch信号通路起负反馈调节作用,对脊髓损伤大鼠起到治疗效果.方法 制备GDNF基因修饰神经干细胞,并通过免疫荧光和Q-PCR对转染效果进行鉴定.将40只雄性SD大鼠随机分成A组(正常对照组)、B组(脊髓损伤组+生理盐水)、C组(脊髓损伤+GDNF基因修饰神经干细胞移植组)、D组(脊髓损伤+GDNF基因修饰神经干细胞移植+电针干预组).各组分别在造模后3天、1周、2周、3周时间点进行取材,通过免疫组化技术、Western B
【机 构】
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陕西中医药大学附属医院,陕西咸阳712000
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目的 通过电针干预GDNF基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤,探讨其能否对Notch信号通路起负反馈调节作用,对脊髓损伤大鼠起到治疗效果.方法 制备GDNF基因修饰神经干细胞,并通过免疫荧光和Q-PCR对转染效果进行鉴定.将40只雄性SD大鼠随机分成A组(正常对照组)、B组(脊髓损伤组+生理盐水)、C组(脊髓损伤+GDNF基因修饰神经干细胞移植组)、D组(脊髓损伤+GDNF基因修饰神经干细胞移植+电针干预组).各组分别在造模后3天、1周、2周、3周时间点进行取材,通过免疫组化技术、Western Blot技术对各组损伤脊髓局部GFAP、dll 1蛋白含量进行测定;以及通过BBB评分系统分析大鼠造模后各个时间点的运动功能,探讨治疗效果.结果 ①免疫组化检测发现C、D组较B组能明显抑制GFAP蛋白含量的表达,D组抑制更明显.且各时间点、各组之间比较差异明显(P＜0.05).②WB检测显示与A组比较,其他组脊髓损伤后的dll 1蛋白含量表达在不同时间点均有所增长,在3d和1周时dll 1蛋白含量高表达,1周时达到峰值,之后蛋白含量表达开始降低,在3周时含量表达最低;B组、C组、D组比较:在3d、1周、2周、3周dll 1蛋白的表达B组＞C组＞D组.各组各时间点对比差异显著(P＜0.05).③BBB评分:B、C、D、三组各节点之间分别进行比较,差异性显著,具有统计学意义(P＜0.05).结论 成功利用慢病毒载体构建GDNF基因修饰神经干细胞.移植后能够抑制GFAP蛋白及dll 1蛋白在脊髓损伤后的表达,对Notch信号通路起负反馈调节作用,从而使NSCs向目的 细胞分化增殖,促进神经再生和功能恢复.并且经电针干预联合治疗后可以对疗效进一步放大.
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