的 探讨叶酸偶联的二氧化硅包覆的金纳米棒 (GNRs@SiO ₂-FA) 探针制备方法和其光学性质,检测探针靶向性,并观察其进入细胞过程。

采用种子生长法制备出金纳米棒,以SiO₂作为壳材,制备出GNRs@SiO₂,最后偶联叶酸得到GNRs@SiO₂-FA。 (1) 利用透射电镜、紫外光谱对制备出的GNRs@SiO₂-FA探针进行检测。 (2) 取对数生长期肝癌HepG2细胞随机分为2组,分别加入金元素浓度为40.0×10^-6、20.0×10^-6、10.0×10^-6、5.0×10^-6、2.5×10^-6的GNRs@SiO₂-FA和GNRs溶液,采用四甲基偶氮唑盐 (MTT) 微量酶反应比色法测得吸光度值 (A值),以此判断其细胞毒性。 (3) 将细胞随机分为2组,分别加入相同金元素浓度的GNRs@SiO ₂-FA和GNRs@SiO ₂溶液,然后孵育2、4、8、16、24 h时,应用电感耦合等离子体质谱法 (ICP-MS) 监测GNRs@SiO₂-FA细胞摄入的靶向性。 (4) 用透射电镜观察GNRs@SiO₂-FA进入细胞过程。所得数据用<img src="images/BZ_E-BZ__93_813_595_832_612.png" alt="patch" />x±s表示,单因素方差分析进行两两组间比较,P<0.05为差异有统计学意义。

紫外图谱证实成功制备GNRs@SiO₂-FA。对2组金浓度相同细胞的A值进行方差分析比较,差异均有统计学意义,金元素浓度从高到低 (40.0×10^-6、20.0×10^-6、10.0×10^-6、5.0×10^-6、2.5×10^-6),2组比较F值分别为191.876、265.419、77.987、52.061、18.745,P值均<0.01。ICP-MS监测结果显示,GNRs@SiO₂组细胞在孵育2、4、8、16、24 h时细胞固体金元素含量分别为 (256.7±3.3) 、 (602.8±2.4) 、 (1067.1±3.6) 、 (1998.5±4.3) 、 (2078.5±1.3) mg/kg,GNRs@SiO2-FA组分别为 (693.1±2.0) 、 (1432.0±2.6) 、 (2331.3±3.5) 、 (2484.5±5.0) 、 (2589.7±2.1) mg/kg,组间两两比较差异有统计学意义 (F值分别为3278.070、34287.199、85434.870、18333.454、42412.973,P值均<0.01),证明叶酸偶联的探针具有很强的靶向性。透射电镜观察到,GNRs@SiO₂-FA与细胞共同培养1 h后,细胞质内见少量纳米探针;4~ 24 h,细胞质内见大量探针,但细胞核内未见。

制备出的GNRs@SiO₂-FA探针具有很好的生物安全性和靶向性。