复制缺陷型HCV C基因腺病毒表达载体的构建包装及鉴定

来源 :世界华人消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qq12441483

【摘要】

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目的:构建能表达HCV C基因的复制缺陷型腺病毒表达载体.方法:将HCV H株C区基因定向插入到腺病毒穿梭质粒pAd.CMV-Link.1中,获得重组质粒pAd.HCV-C,再与pJM1 7共转染293细胞,

【作者】

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郝春秋冯志华周永兴聂青和李谨革贾战生梁雪松谢玉

【机构】

：

中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心

【出处】

：

世界华人消化杂志

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

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复制缺陷型HCV C基因腺病毒表达载体构建包装鉴定

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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目的:构建能表达HCV C基因的复制缺陷型腺病毒表达载体.方法:将HCV H株C区基因定向插入到腺病毒穿梭质粒pAd.CMV-Link.1中,获得重组质粒pAd.HCV-C,再与pJM1 7共转染293细胞,包装腺病毒表达载体.通过酶切、PCR及测序对穿梭质粒进行了鉴定.对腺病毒载体进行了感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定.利用间接免疫荧光法和Western blot检测了腺病毒载体在人肝癌细胞HepG2中的表达.结果:酶切、PCR及测序鉴定证实,穿梭质粒插入片段为HCV C区基因.包装的腺病毒载体具

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