【摘 要】
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以激活磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/内皮型一氧化氮合酶（eNOS）信号通路、抑制心肌细胞凋亡为切入点，探究瓜蒌皮水提物（TP-W）保护心肌缺血的机制。分离大鼠心肌细胞，通过缺氧气体+无血清培养液培养制造缺血缺氧损伤模型；培养液中同时添加PI3K特异性抑制剂（LY294002）和TP-W处理细胞，利用倒置相差显微镜观察细胞形态，噻唑兰（MTT）法、末端标记（TUNEL）法检测
【基金项目】
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国家自然科学基金（81573852）； 山东省自然科学基金（ZR2019BH017）；
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以激活磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/内皮型一氧化氮合酶（eNOS）信号通路、抑制心肌细胞凋亡为切入点，探究瓜蒌皮水提物（TP-W）保护心肌缺血的机制。分离大鼠心肌细胞，通过缺氧气体+无血清培养液培养制造缺血缺氧损伤模型；培养液中同时添加PI3K特异性抑制剂（LY294002）和TP-W处理细胞，利用倒置相差显微镜观察细胞形态，噻唑兰（MTT）法、末端标记（TUNEL）法检测细胞存活率及凋亡率，免疫荧光联合免疫印迹方法定位、定量地检测细胞内PI3K、Akt及eNOS的表达水平和激活程度。结果显示：对上述缺血缺氧损伤的心肌细胞，TP-W可显著改善其生长状态，降低其凋亡率；同时显著上调PI3K等蛋白表达水平及激活程度；但这些效果均可被LY294002显著削弱。可见，激活PI3K/Akt/eNOS信号通路、抑制心肌细胞凋亡可能是TP-W抗心肌缺血的重要机制，也是中药“开胸除痹”的关键生物学内涵。
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