【摘 要】
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为构建能同时表达抗人CD28嵌合重链和嵌合轻链基因的双启动子杆状病毒转移载体,利用PCR法扩增出抗人CD28鼠源性单抗的可变区基因和人IgG1的恒定区基因,再采用一种不需要限制
【机 构】
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苏州大学生命科学学院,苏州大学医学生物技术研究所
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为构建能同时表达抗人CD28嵌合重链和嵌合轻链基因的双启动子杆状病毒转移载体,利用PCR法扩增出抗人CD28鼠源性单抗的可变区基因和人IgG1的恒定区基因,再采用一种不需要限制性核酸内切酶和连接酶的新方法--三引物PCR(TP-PCR)法将两者拼接后分别插入杆状病毒转移载体pAcUW3的ph和p10启动子后,并通过酶切、电泳、PCR扩增和测序对重组体进行了鉴定.研究结果表明,TP-PCR法快速、方便、准确,无需设计外源的DNA序列,就能构建完好的融合表达基因.该转移载体的构建成功为嵌合抗体基因在昆虫细胞中
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