【摘 要】
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目的 在细胞水平探究褪黑素通过NRF2对氯胺酮相关性膀胱炎（KC）尿路上皮损伤的保护作用。方法 首先利用Western blot验证NRF2在氯胺酮刺激后的SV-HUC-1细胞的表达水平变化；构建沉默NRF2的SV-HUC-1细胞株，利用流式细胞术检测氯胺酮共培养后的细胞凋亡率；利用CCK-8筛选褪黑素的工作浓度，将SV-HUC-1细胞分为对照组（CON），氯胺酮组（KET），褪黑素治疗组（KET
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81860142）；
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目的 在细胞水平探究褪黑素通过NRF2对氯胺酮相关性膀胱炎（KC）尿路上皮损伤的保护作用。方法 首先利用Western blot验证NRF2在氯胺酮刺激后的SV-HUC-1细胞的表达水平变化；构建沉默NRF2的SV-HUC-1细胞株，利用流式细胞术检测氯胺酮共培养后的细胞凋亡率；利用CCK-8筛选褪黑素的工作浓度，将SV-HUC-1细胞分为对照组（CON），氯胺酮组（KET），褪黑素治疗组（KET+褪黑素）和褪黑素组，利用Western blot检测NRF2、HO-1蛋白表达丰度，利用实时荧光定量PCR检测IL-6 mRNA表达水平，并测定SOD水平变化情况。结果 氯胺酮共培养后的SV-HUC-1细胞NRF2表达水平显著降低（P ＜0.001）；成功构建沉默NRF2的稳定转染细胞株，si-NRF2组的NRF2表达水平低于si-NC组（P ＜0.05）;si-NRF2+氯胺酮组[（14.717±0.601）%]和si-NC+氯胺酮组[（10.890±0.429）%]的细胞凋亡率显著高于si-NC组[（8.560±0.846）%]（P ＜0.01）和si-NRF2组[（9.023±0.703）%]（P ＜0.01）；且siNRF2+氯胺酮组的凋亡率显著高于si-NC+氯胺酮组（P ＜0.001）。选取100μM为褪黑素的工作浓度。KET组的IL-6mRNA表达水平（1.415±0.286）显著高于CON组（1.024±0.230）（P ＜0.01）;KET+褪黑素组（1.026±0.344）的IL-6mRNA表达水平显著低于KET组（P ＜0.01）;KET+褪黑素组SV-HUC-1细胞的SOD（20.521±1.351）显著高于CON组（15.461±2.018）（P ＜0.001）和KET组（15.763±2.216）（P ＜0.0001）;KET组SV-HUC-1细胞NRF2的表达丰度（0.428±0.101）低于CON组（1.500±0.081）（P ＜0.0001）;KET+褪黑素组的NRF2表达丰度（0.804±0.100）高于KET组（P ＜0.01）。除此之外，KET+褪黑素的HO-1的表达丰度（1.419±0.098）高于CON组（0.352±0.168）（P ＜0.0001）和KET组（0.199±0.046）（P ＜0.0001）。结论 褪黑素能够通过NRF2保护氯胺酮导致的尿路上皮损伤。
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