【摘 要】
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目的 评价基于噬菌体展示技术的羟基磷灰石结合肽的解吸附特征.方法 采用成品羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)作为结合底物,通过X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)对其进行物相鉴定,提取噬菌体DNA测序读取展示肽的序列,扩增制备目标序列YSLHWGE(YSL)的单克隆储液,以肽库中随机挑选的序列VTDSKPK(VTD)为阴性对照;滴度测试测定投入回收比,免疫荧光法验证目标序列的标靶亲和力.参照标准淘选方案,在不同pH值(7.5、6.5、5.5、4.5)缓冲洗脱液中分析目标
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心,武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心,武汉 430030;华中科技大学协和深圳医院口腔科,深圳 518000
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目的 评价基于噬菌体展示技术的羟基磷灰石结合肽的解吸附特征.方法 采用成品羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)作为结合底物,通过X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)对其进行物相鉴定,提取噬菌体DNA测序读取展示肽的序列,扩增制备目标序列YSLHWGE(YSL)的单克隆储液,以肽库中随机挑选的序列VTDSKPK(VTD)为阴性对照;滴度测试测定投入回收比,免疫荧光法验证目标序列的标靶亲和力.参照标准淘选方案,在不同pH值(7.5、6.5、5.5、4.5)缓冲洗脱液中分析目标序列的解吸附特征.结果 YSL和VTD的单克隆储液扩增后滴度均达到1011 pfu/10μL,符合后续实验要求.测序结果得到目标序列和随机序列分别为YSL和VTD.通过重复3次滴度测试计算投入回收比发现,目标序列YSL与HAP的亲和度较高,投入回收比为随机肽VTD投入回收比的17.5倍.这种结合亲和力也通过免疫荧光实验得以验证,结果显示YSL组羟基磷灰石粉末被荧光点亮的面积比例和平均吸光度分别为(71.98±2.30)％ 和(0.10090±0.00544),均显著高于VTD组的(49.95±2.28)％(P<0.01)和(0.04637±0.00117)(P<0.01);发现在不同pH值环境中,YSL解吸附释放的噬菌体数量占原吸附总量的比例均高于随机肽VTD解吸附的比例(P<0.01).结论 羟基磷灰石结合肽序列YSLHWGE对结合底物羟基磷灰石有较好的亲和力且具有一定的随环境pH值变化的缓释能力.
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目的:探讨姜黄素对七氟醚诱发大鼠认知功能障碍的影响.方法:将32只Wistar大鼠随机分为对照组(CON组)、七氟醚组(SEV组)、低剂量姜黄素组(CUR–L组)和高剂量姜黄素组(CUR–H组),每组8只.CUR–L和CUR–H组分别接受200 mg·kg-1和300 mg·kg-1姜黄素灌胃处理6 d,而后SEV组、CUR–L组和CUR–H组采用3.3％七氟醚处理6 h.采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;苏木精–伊红(HE)染色观察海马组织形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠海马组织中
在大脑皮层的发育过程中,神经元迁移是一个关键环节,主要分为放射状迁移和切向迁移两种类型.这两者都涉及前导突的形成以及细胞或胞核的移动等因素.在这些生物学过程中,微丝、微管和中间纤维三种细胞骨架发挥着至关重要的调控作用.其中,微丝由肌动蛋白单体聚合而成,可维持前导突的结构并确定迁移的方向;微管由α、β、γ三种微管蛋白聚合形成,可以促进细胞核的扭曲、延长和移位;中间纤维由中间纤维单体组成,能够介导神经元胞体转移过程中前导端的扭曲.同时,多种小分子蛋白也通过作用于细胞骨架的结构或功能从而参与调控神经元的迁移.该
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随着全球范围内不孕不育发病率的提高，营养对生殖健康的影响越来越受到人们的重视。许多研究结果表明营养状况及日常营养物质的摄入对女性生育能力有着非常重要的影响。营养不良或营养过剩，尤其是微量元素、维生素和三大类营养物质（包括糖类、脂类和蛋白质）在体内的均衡状况与女性生育功能密切相关，并影响着女性卵巢储备、卵子发育、受精、胚胎发育、胚胎种植等整个生育过程。本文就营养状况与主要营养物质对女性生殖生育功能的影响及其作用进行综述。“,”With the increasing incidence of infertil
目的 通过生物信息学方法鉴定与结直肠癌相关的核心基因,并初步验证.方法 从TCGA数据库中下载正常人和结肠腺癌(COAD)患者的临床资料和基因表达数据;从GEO数据库中下载275例结直肠癌患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织基因表达数据.通过差异表达基因分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选差异共表达基因.对差异共表达基因进行GO和KEGG分析,并通过STRING数据库构建蛋白质互作(PPI)网络,最后利用Cytoscape插件CytoHubba提取候选核心基因.将与总生存期(OS)相关的核心基因通过人
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