【摘 要】
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背景与目的:研究表明,在肿瘤细胞中端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)与存活素(Survivin)的表达具有相关性,本研究拟探索肿瘤细胞中hTERT与Surv
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所生物化学与分子生物学实验室,北京,100850
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背景与目的:研究表明,在肿瘤细胞中端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)与存活素(Survivin)的表达具有相关性,本研究拟探索肿瘤细胞中hTERT与Survivin在功能上是否存在相互调控作用.方法:采用反义核酸分别抑制survivin与hTERT在HeLa S3细胞中的表达,端粒重复扩增法检测细胞中端粒酶活性的变化,并分别采用Western印迹与RT-PCR分析细胞中Survivin蛋白水平与mRNA水平的变化,MTT法检测HeLa S3细胞的增殖变化.结果:采用反义核酸抑制HeLa S3细胞中survivin的表达对端粒酶的活性没有影响,但是采用反义核酸No.14抑制hTERT的表达可以显著降低细胞中Surwivin蛋白水平,而mRNA水平未受影响.而且当反义核酸No.14的浓度在200～1 000 nmol/L范围内时,Survivin蛋白水平的下降与反义寡核苷酸的浓度呈正相关,这种下降可以被泛素化蛋白酶抑制剂lactacystin和MG132所抑制.此外,在HeLa S3细胞中同时抑制hTERT与survivin的表达可以协同性地抑制细胞增殖.结论:抑制HeLa S3细胞中hTERT的表达可以促使Survivin蛋白通过泛素蛋白酶体途径降解.
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