miR-148-3p抑制剂下调AKT2调控HUVECs细胞增殖及凋亡机制研究

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目的探究miR-148-3p对模拟角膜新生血管形成常见体外细胞模型人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖及凋亡的影响。方法将HUVECs细胞分为NCinhibitor组、miR-148-3pinhibitor组,过表达AKT2组(转染过表达AKT2质粒)、AKT2siRNA组、miR-148-3pinhibitor组、miR-148-3pinhibitor+AKT2siRNA组,以HUVECs细胞作为空白对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK8)法检测抑制miR-148-3p表达对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞株增殖能力的影响;TargetScan筛选miR-148-3p潜在靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证;蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测AKT2蛋白表达水平变化;采用CCK8法检测miR-148-3pinhibitor+AKT2组在HUVECs细胞中增殖能力影响;采用原位末端标记(TUNEL)细胞凋亡实验检测各组细胞凋亡。结果miR-148-3pinhibitor组中HUVECs细胞增殖能力低于NCinhibitor组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-148-3pinhibitor组AKT2的蛋白表达水平低于miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.01);与NCinhibitor组相比,过表达AKT2组细胞增殖能力升高,而AKT2siRNA组细胞增殖能力降低,miR-148-3pinhibitor组增殖能力降低;miR-148-3pinhibitor+AKT2组增殖能力高于miR-148-3pinhibitor组,差异有统计学意义(P<0.05);与NCinhibitor组比较,miR-148-3pinhibtior组促进细胞凋亡,而相比miR-148-3pinhibtior组miR-148-3pinhibtior+AKT2组细胞凋亡率低于miR-148-3pinhibtior组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论miR-148-3p抑制剂可能通过调控AKT2抑制HUVECs细胞株增殖并促进凋亡。
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