【摘 要】
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目的探讨miR-4279在子宫颈癌的增殖过程中的作用及其作用靶点。方法利用q RT-PCR比较miR-4279在正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞系He La和C-33A中的表达水平;通过转染miR-4279
【机 构】
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青岛市妇女儿童医院生殖中心; 青岛大学附属医院;
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目的探讨miR-4279在子宫颈癌的增殖过程中的作用及其作用靶点。方法利用q RT-PCR比较miR-4279在正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞系He La和C-33A中的表达水平;通过转染miR-4279的模拟物或抑制物的方法来过表达或敲低miR-4279;通过miR-4279靶基因预测网站miRanda和Targetscan,寻找miR-4279的靶基因;通过免疫印迹来检测Gli1的蛋白水平,利用荧光素酶报告系统来检测Gli1 3’-UTR的活性,明确Gli1是否为miR-4279的靶基因。结果 (1)与正常宫颈上皮细胞(1.00±0.02)相比,miR-4279在宫颈癌细胞系He La(0.54±0.10)和C-33A(0.48±0.08)中表达显著较低(P<0.001);(2)网站预测结果显示,Gli1为miR-4279的潜在靶基因;(3)过表达miR-4279下调Gli1的蛋白水平,抑制miR-4279上调Gli1的蛋白水平;(4)过表达miR-4279导致结合Gli1的3’-UTR的能力(1.30±0.03)显著高于对照组(1.00±0.01)(P<0.01),抑制miR-4279导致结合Gli1的3’-UTR的能力(0.43±0.02)显著低于对照组(1.00±0.06)(P<0.001)。结论 miR-4279能够通过Gli1调控宫颈癌的发生发展,是一种潜在的抑癌因子。
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