microRNA(miRNA)是一种调节性的非编码小分子RNA,在不同的调节途径中发挥着关键性的作用。microRNA通过完全或者不完全的碱基配对与靶标分子mRNA的非编码区结合,从而在转录后水平进行引起靶mRNA的剪切或是翻译的抑制。最近研究表明,microRNA参与调解脂肪细胞分化。通过生物信息预测,发现microRNA-27b可能在PPARγ和C/EBPα非编码区上有作用位点。并且mir-27在脂肪细胞分化的第一天显著下调。因此,我们推测mir-27b能负调控脂肪细胞分化的过程,以及在保持前提脂肪细胞的未分化状态中起作用,本研究通过干扰miR-27b能触发脂肪细胞的自发分化,并通过构建荧光素酶报告基因系统,验证了mir-27b是通过靶作用于PPARγ3’非编码区的作用位点来调控脂肪细胞分化的。本研究获得以下结果:(1)采用RNA22软件,分别用已知的小鼠microRNA对PPARγ和C/EBPα的3’UTR进行扫描,结果表明mir-27b能同时作用于PPARγ和C/EBPα的3’UTR,提示mir-27b在脂肪细胞分化中发挥关键作用。(2)用脂质体转染法高效地将miR-27b inhibitor转染3T3-L1细胞系,能触发3T3-L1脂肪细胞发生自发分化。(3)构建Luc-3’UTR载体与miR-27b mimics共转染并成功表达,通过luciferase或绿色荧光的强弱变化初步确定miR-27b的作用位点为的PPARγ3’非编码区。