论文部分内容阅读
目的
构建屋尘螨Der p2变应原突变体的原核表达质粒，并在大肠杆菌中表达、纯化，以观察屋尘螨Der p2变应原突变体的免疫原性以及抗原性。
方法基因敲除屋尘螨Der p2变应原的部分氨基酸残基序列，将编码基因定向克隆到pET32a原核表达质粒中，转入BL21表达菌中并提纯；将18只Balb/c小鼠随机分为Der p2变应原突变体组、重组Der p2组和对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血清中IgE、IgG1与IgG2a抗体变化，用免疫斑点试验测定Der p2突变体的IgE结合能力。
结果成功构建了Der p2变应原突变体的原核表达质粒，表达并纯化了Der p2变应原突变体。腹腔免疫后0 d，各组IgE、IgG1与IgG2a抗体表达无明显变化(P＝0.067、P＝0.052、P＝0.078)；免疫后第7 d，重组Der p2变应原组诱导IgE抗体的产生量高于Der p2变应原突变体组(P＝0.002)，重组Der p2变应原组诱导的IgG2a抗体高于Der p2变应原突变体组(P＝0.0056)；腹腔免疫后第14 d，重组Der p2变应原组IgE抗体的产生量高于Der p2变应原突变体组(P＝0.001)，Der p2变应原突变体组IgG2a低于重组Der p2变应原组(P＝0.0034)。Der p2变应原突变体与屋尘螨过敏患者的阳性血清结合明显较低。
结论Der p2变应原突变体能诱导小鼠产生IgG1抗体和IgG2a抗体，同时能明显减少IgE抗体的产生，并且Der p2变应原突变体具有较低的IgE结合能力。