【摘 要】
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为了检测水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)外壳蛋白(coatprotein,CP)、病害特异蛋白(disease-special protein,SP)和可能的运动蛋白NSvc4自身和两两之间的互作关系,首先
【机 构】
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福建农林大学植物病毒研究所,福建省植物病毒学重点实验室,
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为了检测水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)外壳蛋白(coatprotein,CP)、病害特异蛋白(disease-special protein,SP)和可能的运动蛋白NSvc4自身和两两之间的互作关系,首先通过PCR扩增获得了分别融合有HA或c-Myc标签的RSVCP、SP和NSvc4基因,并将其插入到植物表达载体pEGAD或pKYLX71:35S2中。重组质粒转化根癌农杆菌(Agrobacterium tume-faciens)EHA105后,将含有不同重组质粒的根癌农杆菌菌液混合后注射烟草(Nicotiana benthamiana)叶片。提取烟草中瞬时表达的蛋白,以HA或c-Myc抗体进行免疫共沉淀试验,最后免疫混合物通过c-Myc抗体或HA抗体进行Westernblot检测,确定蛋白的互作情况。结果表明,RSVCP蛋白自身能够发生互作,而CP与SP,CP与NSvc4,SP与SP,SP与NSvc4,及NSvc4与NSvc4蛋白之间均未有检测到互作现象。
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