【摘 要】
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目的：未知蛋白HT036 (Hypothetical protein HT036)是本研究小组前期利用酵母双杂交技术筛选出的P311的相互作用蛋白,本实验拟利用免疫共沉淀技术来验证HT036和P311间的相
【机 构】
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第三军医大学西南医院烧伤研究所 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 重庆400038
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的：未知蛋白HT036 (Hypothetical protein HT036)是本研究小组前期利用酵母双杂交技术筛选出的P311的相互作用蛋白,本实验拟利用免疫共沉淀技术来验证HT036和P311间的相互作用。方法：构建能在哺乳动物细胞中表达带HA标签的HT036融合蛋白(HA-HT036)的重组载体pCMV-HA-HT036,经酶切鉴定正确后,和表达带Myc标签的P311融合蛋白(Myc-P311)的重组真核表达载体pCMV-Myc-p311,单独或者共转染人293细胞,利用免疫共沉淀技术验证HT036与P311间的相互作用。结果：构建的重组表达载体pCMV-HA-HT036经双酶切鉴定正确,转染293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-P311相互作用蛋白复合物后,用抗HA单克隆抗体进行WB检测,可以检测到HA-HT036的表达。
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