Med19过表达慢病毒载体的构建及鉴定

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目的:构建含Medl9基因的过表达慢病毒载体。方法:用PCR技术获得Medl9基因片段,将其连接入酶切后的线性慢病毒载体.转化感受态细胞进行PCR及测序鉴定。脂质体转染法共转染293T细胞,荧光显微镜及Westernblot检测转染效率。包装成慢病毒,实时定量PCR检测病毒滴度。结果:成功获取Medl9基因。测序证实所获取基因序列完全正确。荧光显微镜以及WesternNot检测均证实pGC-FU-Med19携有正确的Medl9基因,并能在293T细胞中表达。实时定量PCR检测病毒滴度为2×10^
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