抗人卵巢癌单域抗体VH基因的克隆、表达及放射免疫显像

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lujun3
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为研究小分子抗体作为导向载体的作用,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B2单域抗体(重链可变区,VH),并进行放射免疫显像(RII).利用PCR技术从COC183B2杂交瘤细胞中扩增COC183B2的VH基因片段,并将其克隆入高效表达载体pTHA90中.重组子转化大肠杆菌TOP10,IPTG诱导表达VH融合蛋白,经改进氯化亚锡法进行锝(99mTc)的标记,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行RII.结果表明:(1)VH融合蛋白以包涵体形式获高效表达;(2)改进氯化亚锡法成功进行VH融合蛋白99mTc的标记,标记率达96%以上;(3)用99mTc标记VH融合蛋白进行RII,肿瘤显像早,图像清晰.说明99mTc可用于小分子抗体标记,应用单域抗体VH可改善RII.
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