LC-MS/MS法测定大鼠口服缩泉胶囊后胆汁中的代谢物(Ⅱ)

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目的研究大鼠灌胃缩泉胶囊后,益智黄酮(杨芽黄素、伊砂黄素、白杨素、山奈素和芹菜素-4’,7-二甲氧醚)二相结合产物的酶水解。方法雄性Sprague-Dawley大鼠胆管插管手术完毕后经灌胃给予缩泉胶囊(1.64 g/kg)后收集0~4 h胆汁。胆汁样品经β-葡萄糖醛酸水解酶(1 000 U/ml,pH为5的乙酸钠缓冲液)处理后,利用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS)进行分析。结果益智黄酮的葡萄糖醛酸结合物在酶水解处理后,代谢物的色谱峰消失,释放出黄酮的原形物质形式。虽然脱甲基反应后形成葡萄糖醛酸结合物也被水解,但并未能检测到脱甲基产物。结论β-葡萄糖醛酸水解酶处理可进一步确定益智黄酮在大鼠胆汁中的物质形式,也为定量分析奠定基础。
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