巴西苏木素对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌抑制作用机制研究

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目的 探讨巴西苏木素对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的体外抑制作用及其机制。方法 收集临床分离的金黄色葡萄球菌,经VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪鉴定为MSSA,采用二倍稀释法和平板法测定巴西苏木素对其的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用绘制生长曲线方法观察巴西苏木素对其生长的影响作用;采用油镜法观察巴西苏木素对MSSA形态的影响;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定巴西苏木素对MSSA可溶性蛋白的影响;采用紫外分光光度计测定其DNA及RNA等大分子物质的外渗水平;通过测量MSSA产溶血环的大小来反映巴西苏木素对α-溶血素分泌的影响;通过建立MSSA生物膜模型、计算生物膜内存活菌的数量反映巴西苏木素对MSSA生物膜的作用效果。结果 巴西苏木素对MSSA的MIC为65μg/mL,MBC为130μg/mL;生长曲线显示巴西苏木素浓度增加,对MSSA的抑制作用增强;镜下形态学的改变表明,药物浓度增加,抑制作用增强,表现为菌体数量减少、干扰菌体繁殖时的聚集;SDS-PAGE蛋白电泳结果表明药物浓度增加,对MSSA可溶性蛋白形成的抑制作用增强;巴西苏木素对MSSA的DNA、RNA的外渗有显著影响(P<0.05),药物浓度增加,外渗量增大;药物浓度增加,溶血环直径减小;药物浓度增加,MSSA生物膜内的存活菌量减少。结论 巴西苏木素对MSSA具有极好的抑制作用且具有浓度依赖性,可能通过减少其可溶性蛋白的形成、改变细胞膜的通透性、影响MSSAα-溶血素的活性,从而起到对MSSA的杀灭作用;药物也可能通过破坏生物膜,减少生物膜内MSSA的存活数量来发挥抑制作用。
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