桑黄素抑制巨噬细胞氧化应激反应的体外研究

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目的 探究桑黄素(Morin)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW 264.7氧化应激过程中的作用及相关机制。方法 体外培养RAW 264.7细胞,分为二甲基亚砜(DMSO)组(DMSO)、LPS组(LPS 1 mg/L)、Morin组(Morin 25.0μmol/L)、LPS+Morin组(LPS 1 mg/L+Morin 25.0μmol/L)。经不同浓度Morin预处理后,予LPS 1 mg/L刺激24 h,四唑盐(MTT)比色法检测不同处理对细胞活力的影响。蛋白免疫印迹法(western blot, WB)和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Morin(25.0μmol/L)对LPS诱导的RAW 264.7细胞中NADPH氧化酶1(NOX1)、NOX4、核因子2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的表达。结果 MTT比色法结果显示,LPS(1 mg/L)和Morin(12.5、25.0μmol/L)对RAW 264.7细胞活力均未造成显著影响(P>0.05)。WB和qRT-PCR结果显示,Morin预处理可显著抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中NOX1和NOX4的表达(P<0.05,P<0.01)。此外,与DMSO组比较,LPS处理上调RAW 264.7细胞中Nrf2和HO-1的表达(P<0.01,P<0.001),Morin处理进一步上调Nrf2和HO-1的表达(P<0.01)。结论 Morin通过激活Nrf2/HO-1信号通路,下调NOX1和NOX4表达,抑制LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞氧化应激反应。
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