【摘 要】
：
目的探讨前列腺癌细胞内肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)的表达变化及其对侵袭转移能力的影响。方法设计合成过表达MYPT1基因的慢病毒质粒(pLenti6.3-MYPT1)，转染前列腺癌PC3及DU145细胞48h，设定对照组(转染对照pLenti6.3-Ctrl)和过表达组(转染pLenti6.3-MYPT1)；采用细胞划痕和Transwell实验检测24h及48h细胞迁移和侵袭能力；免疫荧光(IF)染色检测细胞骨架变化；蛋白质印迹法(Westernblot)和定量聚合酶链式反应(qPCR)检测细胞株(
【机 构】
：
澳门科技大学 中药质量研究国家重点实验室，澳门 999078;广州实验室，广州 510005广州市第一人民医院 华南理工大学附属第二医院泌尿外科，广州 510180广州实验室，广州 510005广州市
论文部分内容阅读
目的探讨前列腺癌细胞内肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)的表达变化及其对侵袭转移能力的影响。
方法设计合成过表达MYPT1基因的慢病毒质粒(pLenti6.3-MYPT1)，转染前列腺癌PC3及DU145细胞48 h，设定对照组(转染对照pLenti6.3-Ctrl)和过表达组(转染pLenti6.3-MYPT1)；采用细胞划痕和Transwell实验检测24 h及48 h细胞迁移和侵袭能力；免疫荧光(IF)染色检测细胞骨架变化；蛋白质印迹法(Western blot)和定量聚合酶链式反应(qPCR)检测细胞株(PC3、DU145)转染后MYPT1和上皮-间充质转化(EMT)相关分子标志物：N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、锌指结构蛋白(Snail)和E盒结合锌指蛋白1(ZEB-1)的mRNA及蛋白相对表达水平。组间统计分析采用独立样本t检验。
结果转染pLenti6.3-MYPT1后，PC3和DU145细胞内MYPT1相对表达水平明显上调，差有统计学意义(Western blot：0.834±0.055、0.849±0.044比0.487±0.026、0.526±0.045，t＝8.098，7.212，P
其他文献
目的筛选乳腺癌铁死亡相关基因，建立乳腺癌铁死亡相关基因的预后风险预测模型。方法通过"DESeq2"软件包进行差异分析，单因素Cox回归、Lasso分析、多因素Cox回归分析以及森林图确定独立风险因子，并建立基于铁死亡相关基因的乳腺癌预后预测模型，并对模型效能进行评价。最后通过基因富集分析(GSEA)展示高低风险组信号通路富集结果差异。结果以log2|FoldChange|>1，P
目的观察乳腺疾病患者血清XPNPEP2(APP2)表达水平，探讨乳腺癌患者血清XPNPEP2表达水平的临床意义。方法收集2021年1月至2021年9月间，华中科技大学同济医学院附属同济医院甲乳外科收治的乳腺肿瘤患者，收集其常规术前血液检验后剩余血清，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中的XPNPEP2水平。以术后常规病理检查将纳入病例分为乳腺癌组(BC)、乳腺良性肿瘤组(BT)及乳腺炎组(BI)，比较组间XPNPEP2水平差异；同时在BC组，分析XPNPEP2与年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移等临床
目的探索三阴性乳腺癌中Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法通过生信分析Rab27A与ZEB1在三阴性乳腺癌中表达，在体外培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)使用慢病毒转染技术进行Rab27A、ZEB1过表达及敲减，并通过回复实验构建Rab27A过表达ZEB1敲减、Rab27A敲减ZEB1过表达的三阴性乳腺癌细胞系。运用蛋白质印迹法(Westernblot)验证其蛋白表达。
目的观察三阴性乳腺癌细胞中长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22(SNHG22)靶向作用于微小RNA(miR)-27a-3p/胰岛素样生长因子-1对细胞侵袭能力的影响。方法选取2019年6月至2022年3月河北医科大学第二医院甲状腺乳腺外科收治30例三阴性乳腺癌及其癌旁组织标本作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌及癌旁组织中SNHG22和miR-27a-3p的表达变化；将SNHG22过表达质粒和miR-27a-3p模拟物(mimics)分别转染至三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中，
目的探讨环状RNARas同源家族成员T1(circ-RHOT1)及微小RNA-204-5p(miR-204-5p)在乳腺癌中的表达及其对人类乳腺癌细胞株7(MCF-7)细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移、凋亡及上皮-间充质转化过程的影响。方法定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circRHOT1及miR-204-5P在乳腺癌细胞系(人源性)MCF-7以及正常乳腺上皮细胞(人源性)MCF-10A中的表达；双荧光素酶实验及qRT-PCR证明circRHOT1和mirR-20-5p的关系。采用噻唑蓝(MT
目的探索黑蒜提取物对人乳腺癌细胞系-7(MCF-7)在增殖以及凋亡方面作用的影响及其所发挥的机制。方法采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测在不同时间(24、48、72h)及不同浓度(0.025、0.050、0.100g/ml)黑蒜提取液对其增殖的影响，克隆形成实验检测细胞(人乳腺癌细胞株MCF-7购自中国科学院细胞库)增殖能力。用流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI双染色法)检测黑蒜提取液对MCF-7细胞凋亡的影响，采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测p53基因(p53)、B淋巴细胞
目的探讨乳腺癌组织中环状RNAhsa_circ_0007813的表达水平及与患者临床病理特征及生存率间的关系。方法选取上海芯超生物科技有限公司的132例乳腺癌组织芯片作为研究对象。采用荧光原位杂交技术(FISH)检测环状RNAhsa_circ_0007813的表达，并分析hsa_circ_0007813的表达与患者临床病理特征及患者预后间的关系。采用χ2检验分析hsa_circ_0007813与临床病理特征间的关系，利用Kaplan-Meier方法评估患者的总生存率，采用Cox回归模型进行多因素分析。结果
目的探讨叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化的影响。方法选取河南大学淮河医院2019年6月至2021年10月收治的64例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用蛋白质免疫印迹分析肿瘤和癌旁组织中FOXA2蛋白表达水平。采用转染试剂转染对照质粒和FOXA2过表达质粒至人卵巢癌细胞SKOV3，分别为对照组和观察组。采用划痕实验、Transwell和蛋白质印迹法(Westernblot)分析对照组和观察组细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力。采用体外移植瘤实验分析两组细胞的迁移能力。
目的探讨CO2点阵激光Fusion融合模式对小鼠皮肤增生性瘢痕(HS)的影响及其机制。方法将50只雄性C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分成空白对照组(空白涂膜剂基质0.1ml)、模型组(空白涂膜剂基质0.1ml)、10mJ激光治疗组(10mJ组)、20mJ激光治疗组(20mJ组)和阳性对照复方醋酸地塞米松乳膏(DXM，0.1ml)组，每组10只。空白对照组皮下注射生理盐水，其余各组小鼠均于背部皮肤注射博来霉素(BLM)(1mg/ml)制作HS模型，3周后采用温哥华瘢痕量表(VSS)评估皮肤瘢痕增生情况
目的探讨嗜麦芽窄食单胞菌对肺腺癌细胞转录组基因表达的影响，分析可能的目标基因。方法实验分为对照组和嗜麦芽窄食单胞菌组，嗜麦芽窄食单胞菌作用于A549细胞系4h后利用转录组学测序分析基因表达，筛选差异表达的基因，通过基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书KEGG富集分析，并且使用BroadInstitute开发的基因集富集分析(GSEA)算法进行分析，帮助识别所选择的样本中表达量变化最明显的基因集中在哪些通路、生物学过程或功能组分等。结果经过限定条件的筛选，共有2285个基因差异表达，其中上调的