连翘酯苷A对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

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目的 研究连翘酯苷A对肝星状细胞增殖活化以及凋亡的影响。方法 以人肝星状细胞(LX-2)作为模型,采用血小板衍生生长因子(PDGF)-BB模拟肝纤维化微环境,实验分为对照组、PDGF-BB组、连翘酯苷A组以及PDGF-BB+连翘酯苷A组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LX-2细胞活力;采用油红O检测细胞内脂滴的情况;采用免疫组织化学荧光染色检测细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测纤维化相关标志蛋白和凋亡相关蛋白的表达情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 连翘酯苷A处理后LX-2细胞活力明显下降,且呈剂量依赖性;油红O实验表明,与PDGF-BB处理组比较,连翘酯苷A组细胞内脂滴数量增多;免疫荧光结果表示,与PDGF-BB模型组相比,连翘酯苷A组细胞内α-SMA荧光斑点的数量减少;Western Blot实验结果显示,连翘酯苷A组,α-SMA、α1-I型胶原蛋白(COL1A1)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(BCL-2)的表达减少,剪切的-腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、剪切的-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase-3)蛋白的表达增加。结论 连翘酯苷A可抑制肝星状细胞的增殖、活化促进其发生凋亡,改善PDGF-BB诱导的体外肝纤维化。
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