本试验旨在探究不同发酵条件对复合益生菌发酵饲料品质的影响。选用 3 株乳酸菌（ 鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌、干酪乳杆菌） 、2 株酵母菌（ 酿酒酵母菌、毕赤酵母菌） ，采用 4 因素（ 接种比例、接种量、水料比、温度） 3 水平正交设计对精补料发酵条件进行优化，共设 9 个组，测定各组发酵饲料中氨态氮（ NH3-N ） 、可溶性糖（ SS） 、淀粉（ ST ） 含量，pH 以及 3 种霉菌毒素———黄曲霉毒素 B1（ AFB1） 、玉米赤霉烯酮（ ZEN） 、呕吐毒素（ DON） 含量和微生物群落结构变化，用极差分析法确定综合指标最优时的发酵条件; 将精补料在最优发酵条件下发酵不同时间（ 0、1、3、5、7、10、15 d） ，通过测定发酵饲料中常规营养成分含量、酶活性、霉菌毒素含量以及有氧稳定性，确定最佳发酵时间。结果表明: 1) AFB1、ZEN 含量优化组为 G1（ 接种量 5%，接种比例1 ∶1、温度 20 ℃ 、水料比 0.4∶1） 、G7 组（ 接种量 15%，接种比例 2∶1、温度 20 ℃ 、水料比 1∶1） ,NH3-N含量优化组为 G3（ 接种量 5%，接种比例 2∶1、温度 30 ℃ 、水料比 1∶1） 、G7 组，ST 含量优化组为G6 组（ 接种量 10%，接种比例 2 ∶ 1、温度 30 ℃ 、水料比 0. 4 ∶ 1） ,DON 含量优化组为 G5（ 接种量10%，接种比例 1∶2、温度 25 ℃ 、水料比 1∶1） 、G7 组，SS 含量优化组为 G4（ 接种量 10%，接种比例 2∶1、温度 20 ℃ 、水料比 0.6∶1） 、G6 组。2) 16S 测序结果显示，G3 组发酵饲料中微生物的 α多样性和 β 多样性均显著高于 G1、G2（ 接种量 5%，接种比例 1∶2、温度 25 ℃ 、水料比0.6 ∶1） 、G4、G6、G7、G8（ 接种量 15%，接种比例 1∶ 1、温度 30 ℃ 、水料比 0.4∶ 1） 、G9 组（ 接种量 15%，接种比例 1∶2、温度 25 ℃ 、水料比 0.6∶1） （ P<0.05） ，略高于 G5 组（ P>0.05） ; G3 组中植物乳杆菌（ Lactobacillus plantarum） 、短乳杆菌（ Lactobacillus brevis） 的相对丰度显著高于 G1、G2、G4、G5、G6、G8、G9 组（ P<0.05） ，与 G7 组差异不显著（ P>0.05） 。3) 与发酵第 0 天（ 未发酵） 时相比，发酵饲料粗蛋白质（ CP） 含量、纤维素酶（ CL） 、脂肪酶（ LPS） 、酸性蛋白酶（ ACP） 活性均在发酵第5 天时显著升高（ P<0.05） ,NH3-N 、中性洗涤纤维（ NDF） 、酸性洗涤纤维（ ADF） 含量均在发酵第5 天时显著降低（ P<0.05） ,β-淀粉酶（ β-AL ） 活性、pH 以及 SS、ST 、AFB1、ZEN、DON 含量均在发酵第 10 天时显著降低（ P<0.05） 。4) 发酵饲料有氧暴露 20 d 后，其中心温度高出环境温度2 ℃ ，同时 pH 异常增大。结论: 1) 精补料最优发酵条件为接种量 5%，接种比例 2∶1、温度 30 ℃ 、水料比 1∶1，该发酵条件能够有效提高发酵饲料中微生物的多样性，提高 Lactobacillus brevis 的相对丰度。2) 精补料最佳发酵时间为 5 d，该发酵时间可提高发酵饲料的营养成分含量，降低霉菌毒素含量。3) 发酵结束开盖后，发酵饲料应在 20 d 内喂完。