【摘 要】
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通过自交不亲和甘蓝‘A1’自花授粉1 h和未授粉柱头蛋白质表达谱的对比,鉴定出1个受自花授粉诱导上调表达的蛋白,通过PCR技术获取了其编码序列,命名为BosiPA1蛋白,其基因全长
【机 构】
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西南大学园艺园林学院,南方山地园艺学教育部重点实验室,西南大学农学与生物科技学院,
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通过自交不亲和甘蓝‘A1’自花授粉1 h和未授粉柱头蛋白质表达谱的对比,鉴定出1个受自花授粉诱导上调表达的蛋白,通过PCR技术获取了其编码序列,命名为BosiPA1蛋白,其基因全长为3 730 bp,具有1个1 092 bp的完整编码框(KF314579)。BosiPA1由6个外显子、5个内含子组成,编码363个氨基酸。序列分析表明BosiPA1蛋白具有典型的basic helix-loop-helix(bHLH)功能域,在SCR、SRK、Exo70A1基因的ATG上游启动子序列中存在可以被bHLH功能区识别并结合的E-box(CANNTG)序列。在分子进化上甘蓝BosiPA1与AtbHLH128距离最近,与AtHEC1/2/3和TgGBOF-1处在同一个分支。RT-PCR检测表明甘蓝BosiPA1基因在花瓣、萼片、花粉、柱头和叶片中均有表达;荧光定量PCR分析表明BosiPA1基因在自花授粉10 min、30 min、1 h的柱头中呈逐渐上升趋势。上述结果说明BosiPA1与bHLH的进化分支较早,可能是一个参与甘蓝多器官发育的自交不亲和相关的转录因子。
A self-pollination-induced up-regulated protein was identified by comparing the self-pollinated ’A1’ self-pollinated 1 h with the non-pollinated stigma protein expression profile. The coding sequence was obtained by PCR and named The BosiPA1 protein has a full-length gene of 3 730 bp with a 1 092 bp complete coding sequence (KF314579). BosiPA1 consists of 6 exons and 5 introns and encodes 363 amino acids. Sequence analysis showed that there are typical basic helix-loop-helix (bHLH) domains in BosiPA1 protein. There are E-box (CANNTG) which can be recognized and bound by bHLH functional region in ATG upstream promoter sequence of SCR, SRK and Exo70A1 gene, sequence. In molecular evolution, cabbage BosiPA1 is closest to AtbHLH128 and is on the same branch as AtHEC1 / 2/3 and TgGBOF-1. The results of RT-PCR showed that BosiPA1 gene was expressed in petals, sepals, pollens, stigma and leaves. Fluorescence quantitative PCR analysis showed that the BosiPA1 gene was gradually increased in the stigma at 10 min, 30 min and 1 h after self-pollination. The above results indicate that the evolutionary branch of BosiPA1 and bHLH was earlier, which may be a self-incompatibility-related transcription factor involved in multiple organs development in cabbage.
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