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大肠杆菌原核表达载体pSBET-His的构建

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liuxing_001

【摘 要】

：

为了构建原核表达载体pSBET-His。pSBETa质粒经XbaI和BamH I限制性内切酶双酶切,获得原核表达载体的骨架。以pET28a（＋）为模板,通过高保真PCR法应用T7 promoter引物和T7 terminat

【作 者】

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陈正斌  谭仲夏  秦西云 

【机 构】

：

云南省烟草科学研究所,云南农业大学植物保护学院

【出 处】

：

安徽农业科学

【发表日期】

：

2007年27期

【关键词】

：

原核表达载体 pSBET-His 构建 

【基金项目】

：

云南省烟草公司科技项目(04A18)

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为了构建原核表达载体pSBET-His。pSBETa质粒经XbaI和BamH I限制性内切酶双酶切,获得原核表达载体的骨架。以pET28a（＋）为模板,通过高保真PCR法应用T7 promoter引物和T7 terminator引物对pET28a（＋）载体T7表达区域进行扩增,PCR产物电泳纯化后经双酶切和纯化获得138 bp含His-Tag序列的片段。将pSBET原核表达载体骨架和含有His-Tag序列的片段进行连接后转入DH5α感受态细胞中,经菌落PCR及酶切筛选构建pSBET-His。成功构建了pS

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