【摘 要】
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根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) EST序列信息设计引物, 用RT-PCR方法, 从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090 bp的hsc70 cDNA序列, 包括长1956 b
【机 构】
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中国科学院海洋研究所,德州学院生物系,中国科学院研究生院
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根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) EST序列信息设计引物, 用RT-PCR方法, 从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090 bp的hsc70 cDNA序列, 包括长1956 bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5′端和3′端非翻译区(5′UTR 和3′ UTR). PCR及测序结果分析显示, hsc70 cDNA的1～547 bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子, 548～2090 bp碱基所对应的基因组序列不含内含子. 根据编码序列推导出相应的652个氨基酸, 与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较, 发现中国明对虾HSC70 与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71, 人(Homo sapiens)HSC70, 家鼠(Mus musculus )HSP70, 烟草天蛾(Manduca sexta )HSC70的相似性分别是85.9%, 85.9%, 85.8%, 85.4%, 表现出较高的保守性. 表达分析显示, hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在, 并呈组成性表达; 受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β- actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异.
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