【摘 要】
：
目的:研究过表达miR-155对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响。方法:(1)用重组腺病毒Ad-BMP9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,定量PCR(qPCR)检测miR-155的表达,R
【机 构】
：
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;
【基金项目】
：
国家自然科学基金面上项目(NSFC 81672103),国家自然科学基金(NSFC 31200971);教育部高等学校博士点基金(20115503110009);重庆市渝中区科委科技项目(20130136)资助项目
论文部分内容阅读
目的:研究过表达miR-155对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响。方法:(1)用重组腺病毒Ad-BMP9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,定量PCR(qPCR)检测miR-155的表达,RT-PCR检测Runx2和ALP的表达。(2)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测miR-155的表达,ALP活性和染色检测早期成骨能力。(3)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,诱导分化14d茜素红S染色检测晚期成骨能力。(4)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN的表达。(5)miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,Western blot检测p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达。(6)qPCR和Western blot分别检测HIF1α和VEGF的mRNA表达水平和蛋白质表达水平。(7)应用荧光素酶报告基因对miR-155的靶基因进行筛选和验证。结果:在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,过表达miR-155降低ALP活性及染色;减少钙盐沉积;成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN表达降低;抑制p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达;HIF1α和VEGF的mRNA和蛋白表达水平减少。在对靶基因的检测中,过表达miR-155可以抑制HIF1α蛋白水平的表达,但对其mRNA水平无明显影响。结论:miR-155过表达减弱BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化,可能是通过抑制Smad/BMP信号通路发挥作用,也有可能是通过抑制靶基因HIF1α的表达来发挥作用。
其他文献
2005年2月28日,第十届全国人民代表大会常务委员会第十四次会议通过《全国人民代表大会常务委员会关于司法鉴定管理问题的决定》(以下简称《决定》),明确规定了司法鉴定管理
基于本体异质结的聚合物太阳电池性能与相分离结构特别是聚合物的聚集结构密切相关.本文综述了一些典型共轭聚合物聚集结构方面的研究进展,详细介绍了基于齐聚噻吩、二噻吩、
将70例临床诊断为病理性黄疸的患儿分成治疗组45例和对照组25例.治疗组加用微生态制剂治疗,对照组予常规治疗.观察两组患儿临床黄疸消退时间,同时做血清胆红素值治疗前后的比
坦荡无私,是邓小平同志一生最光辉的人格魅力,也永远是中国共产党人应该锤炼的品质修养。学习邓小平高尚品质,树立俭以养德意识,锤炼个人品质,积极践行社会主义核心价值观。
在清代艺术史上,恽寿平(1 633-1 690)是一位身份特殊、地位特殊但却成就非常高的艺术家。作为清代花鸟画坛的领军人物,恽寿平的花卉宗徐熙而独创一格,与四王、吴历并称“清初
持续经营不确定性审计意见在全部非标准意见中的比例呈不断上升趋势，审计师出具该类意见的具体原因突破了准则界定的范围，不同审计意见类型下的持续经营及其在审计报告披露中存
本实验研究从柚皮中提取活性物质来阻断西式火腿中亚硝胺的形成。确定了柚皮提取物的最佳提取条件和不同添加量的柚皮提取物阻断西式火腿中亚硝胺形成的效果。结果表明：柚皮提
介绍使用目测代替光照的方法在三维图上绘制阴影,分析了它的特点、适用对象,并介绍绘图的方法、步骤以及技巧,将之应用于教学可带来良好的辅助效果。
针对目前有线列车车轮传感器安装距离远、施工困难、不易组网等问题,结合zigbee网络技术设计了一套新型的无线车轮传感器。本文通过对Zigbee网络技术的分析,利用车轮传感器、
文章针对现在国内生物柴油面临的原料问题，分析了我国茶油副产物作为生物柴油原料的合理性在于理化性质较优、来源稳定，约能满足我国2．74％的柴油需求。同时提出将茶油副产物做生