^88Arg IL-2的克隆构建及原核表达

来源 :青岛大学医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hddyy

【摘要】

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目的构建^88ArgIL-2的重组克隆，并在大肠杆菌中表达。方法根据天然IL-2的基因序列设计含目的突变位点的引物，经PCR定点诱变技术获得^88ArgIL-2的重组克隆，插入原核表达质粒pGE

【作者】

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孟林刘明军王斌钱冬萌

【机构】

：

青岛大学医学院微生物学教研室

【出处】

：

青岛大学医学院学报

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

白细胞介素2 基因突变原核表达蛋白质印迹法 MTT比色法 interleukin-2 gene mutation prokaryotic express

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目的构建^88ArgIL-2的重组克隆，并在大肠杆菌中表达。方法根据天然IL-2的基因序列设计含目的突变位点的引物，经PCR定点诱变技术获得^88ArgIL-2的重组克隆，插入原核表达质粒pGEX4T-2中．经IPTG诱导在大肠杆菌DH5α中表达^88ArgIL-2与GST的融合蛋白。结果所表达的蛋白相对分子质量约为42000。Western blot检测结果表明，该蛋白具有与亲本IL-2相同的抗原性。MTT比色结果表明，^88ArgIL-2可促使IL-2依赖细胞株CTLL-2生长，具有与亲本IL-

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