目的研究胶质瘤细胞IDH突变对时钟基因表达和细胞周期的影响,进而观察PCL2基因对胶质瘤细胞时钟基因和表达周期性振荡规律的调节作用,探讨PCL2促进胶质瘤增殖的可能机制。方法1.利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库检测肿瘤中核心时钟基因BMAL1和CLOCK的表达以及在GBM和LGG组织中正负时钟调节基因的表达。2.利用IDH突变慢病毒载体感染人胶质瘤U87-MG细胞系,Western blot实验检测IDH突变体、相关周期蛋白和时钟基因、以及TGF-β/Smad信号分子的表达,流式细胞仪检测各组细胞周期,平板克隆实验检测细胞增殖能力。3.利用腺病毒载体进行U87-MG细胞中PCL2基因的过表达和干扰,RT-PCR检测PCL2基因以及相关时钟基因的m RNA水平,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光检测BMAL1和CLOCK在细胞内的表达和定位,Western blot检测PCL2、时钟基因BMAL1、CLOCK,正性和负性时钟调节基因PER1、PER2、PER3、CRY1和CRY2的表达变化,检测这些时钟基因的周期振荡的节律变化,以及相关周期蛋白、PTEN、PRC1和PRC2复合体核心蛋白的表达。结果1.TCGA数据库结果提示BMAL1和CLOCK在胶质瘤等多种肿瘤中异常表达,在GBM和LGG组织中正负时钟调节基因表达异常。2.IDH突变基因表达,集落形成实验显示IDH突变细胞增殖能力下降,细胞周期检测显示IDH突变细胞在G1期占比升高,S期占比降低。Western blot显示,IDH突变细胞Cyclin A和CDK2表达降低、Cyclin D3和CDK4表达增加、Cyclin B1无明显变化。时钟调节基因BMAL1、CLOCK、PER1、PER2、PER3、CRY1和CRY2表达均明显降低,TGF-β/Smad信号分子Smad2、Smad3、Smad2表达降低,p-Smad2、p-Smad3、Smad4表达升高。3.过表达和干扰PCL2改变胶质瘤U87-MG细胞时钟基因的表达和周期振荡的节律性,细胞周期检测显示过表达PCL2的细胞在S期占比增加,S期相关周期蛋白Cyclin A和CDK2表达升高。过表达的PCL2上调PRC2核心蛋白EZH2、下调PRC1核心蛋白BMI1,RING1A和RING1B的表达,干扰PCL2后得到相反的结果;利用TCGA数据库可见胶质瘤中PCL2和PTEN的表达呈正相关,并通过Western blot实验证实。结论:1.时钟基因在胶质瘤中异常表达。2.IDH突变改变胶质瘤细胞时钟基因的表达,调节TGF-β/Smad信号通路影响细胞增殖和周期。3.PCL2调节胶质瘤细胞时钟基因的表达和周期性振荡,作用于PRC1和PRC2复合体核心蛋白,影响PTEN,促进胶质瘤细胞增殖。