【摘 要】
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目的本研究通过探究H.pylori感染的贲门组织中单个核细胞（CD3、CD8、CD20和CD68）的浸润以及DNA双链损伤修复蛋白53BP1和MDC1的表达情况,初步探讨贲门组织中H.pylori感染、单个核细胞亚群和DNA双链损伤修复蛋白间的相互作用。材料和方法1.标本:贲门内镜组织标本共57个,其中18个标本（18例病人）来自汕头大学医学院附属肿瘤医院内镜室和39个标本（27例病人）来自深圳市
【基金项目】
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国自然科学基金NSFC（81772997）；
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目的本研究通过探究H.pylori感染的贲门组织中单个核细胞（CD3、CD8、CD20和CD68）的浸润以及DNA双链损伤修复蛋白53BP1和MDC1的表达情况,初步探讨贲门组织中H.pylori感染、单个核细胞亚群和DNA双链损伤修复蛋白间的相互作用。材料和方法1.标本:贲门内镜组织标本共57个,其中18个标本（18例病人）来自汕头大学医学院附属肿瘤医院内镜室和39个标本（27例病人）来自深圳市第二人民医院内镜室。GES-1细胞购于BNCC公司,H.pylori菌株来自于课题组分离培养。2.HE染色,免疫组化和PCR:对贲门内镜标本进行HE染色观察组织学形态和炎症等级,免疫组化（HP）和PCR用来筛选H.pylori阳性和阴性的贲门组织。使用抗体LCA/CD3/CD8/CD20/CD68分别检测炎细胞、总T细胞、CD8+T细胞、B细胞和巨噬细胞,评估H.pylori感染的贲门组织中单个核细胞浸润的情况;检测53BP1和MDC1蛋白在H.pylori感染的贲门组织中的表达情况。3.免疫荧光:检测感染H.pylori的GES-1细胞中53BP1和MDC1的表达情况。4.统计:SPSS19.0进行统计分析,Graphpad6.0作图。根据数据的类型选用Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis H检验和Spearman秩相关等方法。P<0.05表示有统计学意义。结果1.在H.pylori感染的样本中,炎细胞总数比较多,炎症强度也比较强。H.pylori感染的腺体周围有多量的T细胞,特别是CD8+T细胞的聚集和浸润,感染灶的周围也有较多的巨噬细胞和B细胞。随着H.pylori定植密度的增加,B细胞数也随之增加。2.H.pylori（-）和H.pylori（+）贲门组织浸润LCA+细胞数目的中位数为64.9(P25～P75:49.3～91.6)和100.0(P25～P75:75.3～124.3),这两组的LCA+细胞浸润数目存在差异（P=0.009）。不同H.pylori定植密度组间的浸润的LCA+细胞数的结果显示LCA+细胞数存在差异（P=0.002）。LCA阳性细胞数与H.pylori定植密度存在正相关（rs=0.480,P<0.001）。3.H.pylori（-）和H.pylori（+）贲门组织浸润的CD20+B细胞数中位数分别为1.2(P25～P75:0.2～5.7)和28.3(P25～P75:7.9～49.9),两组间存在差异（P<0.001）。不同H.pylori定植密度分组间,CD20+细胞数在存在差异（P=0.001）,CD20+B细胞数与H.pylori定植密度存在正相关（rs=0.473,P<0.001）。4.H.pylori（-）和H.pylori（+）贲门组织浸润的CD3+T细胞数中位数分别为40.2(P25～P75:34.1～52.5)和44.4(P25～P75:29.8～62.5),无统计学意义（P=0.555）;浸润的CD8+T细胞数中位数分别为32.7(P25～P75:22.4～39.1)和26.4(P25～P75:17.8～33.6),无统计学意义（P=0.132）。5.H.pylori（-）和H.pylori（+）贲门组织浸润的CD68+巨噬细胞数中位数分别为27.7(P25～P75:18.8～35.7)和22.5(P25～P75:16.3～32.9),无统计学意义（P=0.132）。6.与未感染H.pylori的贲门相比,53BP1和MDC1蛋白增加（P<0.001,P=0.007）。两个蛋白均与H.pylori定植密度呈正相关关系（rs=0.828,P<0.001;rs=0.513,P<0.001）。7.DNA双链损伤修复蛋白53BP1、MDC1与LCA之间具有正相关关系（rs=0.411,P=0.002;rs=0.377,P=0.006）。DNA双链损伤修复的2个指标的蛋白表达水平呈现为正相关关系（rs=0.409,P=0.003）。结论1.H.pylori感染的腺体周围有多量的T细胞,特别是CD8+T细胞的聚集和浸润,也看到了较多的巨噬细胞和B细胞在H.pylori感染灶的周围。随着H.pylori定植密度的增加,炎细胞和B细胞数也随之增加。2.感染H.pylori的贲门中53BP1和MDC1蛋白表达上调,随着H.pylori定植密度增加,53BP1和MDC1蛋白表达增加,提示在H.pylori感染中,DNA双链损伤修复发挥了作用。3.感染H.pylori的贲门中53BP1和MDC1蛋白表达与炎细胞数呈正相关关系,提示DNA双链损伤修复与炎症有关,且炎细胞数越多,炎症越重,DNA双链损伤修复也越明显。
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