【摘 要】
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背景:胃癌（Gastric cancer,GC）是包括中国在内的东亚地区最常见的癌症之一,是世界第三大因肿瘤导致的死亡原因。环状RNA（circRNA）作为一种没有5’端帽子和3’端ploy（A）尾的环状结构,其具有更好的保守性和稳定性,越来越多的研究表明circRNA参与了多种癌症的发生发展。然而,关于circRNA在胃癌中的作用并未完全阐明。因此,探究circRNA在胃癌发生发展中的作用及机制
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背景:胃癌（Gastric cancer,GC）是包括中国在内的东亚地区最常见的癌症之一,是世界第三大因肿瘤导致的死亡原因。环状RNA（circRNA）作为一种没有5’端帽子和3’端ploy（A）尾的环状结构,其具有更好的保守性和稳定性,越来越多的研究表明circRNA参与了多种癌症的发生发展。然而,关于circRNA在胃癌中的作用并未完全阐明。因此,探究circRNA在胃癌发生发展中的作用及机制,有助于胃癌的早期诊断,为胃癌的临床治疗和预后判断等提供新思路。目的:1.探究circ-CEP85L在胃癌组织中的表达情况及其对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。2.探究circ-CEP85L调控胃癌发展的机制。方法:1.circRNA表达谱芯片检测5例胃腺癌组织相对于癌旁组织中差异表达的circRNAs。2.通过实时荧光定量PCR（q RT-PCR）验证差异表达的circRNAs在胃癌组织以及对应的癌旁组织中的表达情况,并筛选出circ-CEP85L作为研究对象。3.通过Rnase R酶验证circ-CEP85L对其的耐受性。4.通过在胃癌细胞株（MGC-803、AGS）中瞬时转染circ-CEP85L过表达和敲低质粒,构建circ-CEP85L过表达和敲低胃癌细胞。5.CCK8、划痕实验、平板克隆形成实验以及侵袭小室实验观察circ-CEP85L对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。6.裸鼠移植瘤模型及活体成像验证circ-CEP85L在体内对胃癌细胞肿瘤形成的影响。7.双荧光素酶报告实验验证circ-CEP85L与miR-942-5p,以及miR-942-5p与NFKBIA是否结合。8.荧光原位杂交实验（FISH）验证circ-CEP85L与miR-942-5p在细胞中的定位情况。9.挽救实验验证circ-CEP85L与miR-942-5p、NFKBIA之间相互关系。结果:1.环状RNA circ-CEP85L在胃癌组织相对于癌旁组织中低表达。2.在胃癌细胞（MGC-803）中过表达circ-CEP85L,抑制胃癌的增殖、侵袭和迁移,在胃癌细胞（AGS）中敲低circ-CEP85L则出现相反效果。3.活体成像:裸鼠腹腔注射过表达circ-CEP85L胃癌细胞MGC-803组,荧光值低于对照组。4.circ-CEP85L与miR-942-5p共定位于细胞胞质中,且circ-CEP85L与miR-942-5p以及miR-942-5p与NFKBIA相互结合。5.miR-942-5p能够阻碍circ-CEP85L对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。6.miR-942-5能够抑制NFKBIA蛋白的形成。7.circ-CEP85L通过miR-942-5促进NFKBIA蛋白的表达。结论:1.环状RNA circ-CEP85L在胃癌组织相对于癌旁组织低表达,且circ-CEP85L抑制胃癌的增殖、侵袭和迁移。2.环状RNA circ-CEP85L通过内源竞争性结合miR-942-5p,抑制miR-942-5p对NFKBIA m RNA的结合与降解,促进了NFKBIA蛋白的翻译,进而抑制胃癌的发展。
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