基于UPLC-MS的麻黄多糖质量评价模式初步研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wdyyy
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麻黄多糖具有显著的免疫抑制作用,并证实其对自身免疫性疾病具有良好的治疗作用。鉴于麻黄多糖的重要生物活性,其质量评价显得尤为重要,国内外对多糖的质量控制主要通过控制多糖含量和分子量分布来实现。本实验以麻黄多糖为研究对象,建立麻黄多糖的UPLC-MS色谱分析方法,以期能够实现麻黄多糖的质量控制。本论文包括以下主要内容:1.基于HILIC-LC-MS的麻黄多糖的检测研究。应用亲水作用液相色谱(HILIC)联合质谱检测分析方法拟建立一种简单、快速、准确、灵敏度高、重现性好的多种单糖完全基线分离的色谱分析方法。该方法通过质谱检测糖类化合物(0,3)位跨环裂解碎片离子,不需要糖类化合物的柱前衍生,具有专属性强、前处理简单、准确可靠等优点,可用于植物多糖中单糖组成及含量的快速检测。但是这种方法具有一定的局限性,增加目标化合物的数量后不能达到完全分离的目的,因此我们尝试建立一种经PMP衍生化的新的UPLC-MS检测方法。2.基于LC-MS柱前衍生的麻黄多糖检测研究。Cortecs C18是一款通用型高效反相色谱柱,采用了先进的实心核颗粒和色谱柱填充技术,同等条件下,与HILIC色谱柱相比,其能显著提高难分离物质的分离度,从而可以更为准确地表征和定量分析物。经PMP衍生化的单糖或寡糖能明显提高其检识度,因此采用响应曲面法优化了 PMP衍生条件,以求达到理想的分析检测目的。我们以Cortecs UPLC C18色谱柱,在负离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定,建立UPLC-MS方法同时测定经PMP衍生化的单糖及寡糖的方法。同时以该种方法对麻黄多糖的酸水解和酶解样品进行分析,得到各麻黄多糖酸水解及酶解下的单糖组成和含量。3.采用聚类分析和主成分分析等多元统计学方法,对源自4种不同种、不同用药部位传统中药麻黄多糖进行区分和辨别,结果表明上述建立的方法可以大致区分麻黄的不同种类和用药部位,为麻黄多糖的质量控制提供了新的依据。本实验为评价麻黄多糖的质量控制提供了切实可行的科学方法和坚实的理论依据,同时也为中药多糖部位质量控制和评价提供参考基础。
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