【摘 要】
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刺五加叶,五加科植物刺五加Acanthoponax senricosus(Rupr.et Maxim.)Harms的干燥叶。夏秋两季均可采摘,除去杂质,晒干或烘干。主产于黑龙江地区。味辛、苦,性平,归肝、肾经。具有补益肝肾,益精壮骨之功效。用于短暂性脑缺血,脑动脉硬化,脑栓塞等,亦用于冠心病,心绞痛,以及神经衰弱、更年期综合征等。本论文对刺五加叶的化学成分的质量控制及其药代动力学进行了如下研究:通
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刺五加叶,五加科植物刺五加Acanthoponax senricosus(Rupr.et Maxim.)Harms的干燥叶。夏秋两季均可采摘,除去杂质,晒干或烘干。主产于黑龙江地区。味辛、苦,性平,归肝、肾经。具有补益肝肾,益精壮骨之功效。用于短暂性脑缺血,脑动脉硬化,脑栓塞等,亦用于冠心病,心绞痛,以及神经衰弱、更年期综合征等。本论文对刺五加叶的化学成分的质量控制及其药代动力学进行了如下研究:通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)联用技术,采用HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以水-0.1%甲酸(A)和乙腈-0.1%甲酸(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,柱温40℃,进样量5 μL;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,分别在正、负离子模式下采集数据,运行时间30 min,使用质谱分析软件,通过保留时间、精确相对分子质量及二级质谱裂解碎片信息鉴定监测到的化学成分以对刺五加叶的化学成分进行鉴定。结果表明,通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献共鉴定55个化合物的结构,其主要结构类型为三萜皂苷类、黄酮及黄酮苷类、脂肪酸类、酚酸类、环烷醇类、苯丙素类。采用水蒸气蒸馏法对刺五加叶挥发油进行提取,并用GC-MS对刺五加叶中挥发油主要成分进行定性鉴别,GC-MS采用70eV的标准电压的EI源,所得到的质谱图具有高度重现性,并通过借助相应的化学成分数据库及计算机检索等方法以获得鉴别结果。试验中共鉴别出48种挥发性成分。建立了同时测定刺五加叶中绿原酸(CA)、芦丁(RT)、金丝桃苷(HS)和异槲皮苷(IQ)的UPLC-DAD含量测定方法,并对该方法做了系统的方法学验证。结果表明,该方法可用于刺五加叶中4种成分的含量测定,并对9批产地的刺五加叶药材进行测定,其中产地最优的为五常。采用UPLC-ESI-MS/MS分析技术,建立了测定大鼠血浆中的CA、RT、HS和IQ浓度的方法。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8 μm);流动相为水-0.1%甲酸(A)和乙腈-0.1%甲酸(B);梯度洗脱:0-8min(90%-78%A),8-9min(78%-90%A),9-10min(90%A);采用负离子检测模式,MRM扫描模式。CA,RT,HS,IQ及IS的离子对分别为 m/z 353.1→191.1,m/z 609.1→300.0,m/z 463.1→300.0,m/z 463.1→300.0及m/z 327.1→192.0。结果表明,4种成分在相应的线性范围内均呈现良好的线性关系;其标准曲线的范围分别为1.28-1227,0.51-409.2,1.54-1023和0.256-409.6 ng/mL。日内、日间精密度、稳定性、提取回收率均符合生物样品分析测定的要求,此方法简单、快速、方便,且血浆中的内源性物质对样品峰均不干扰。大鼠灌胃给予刺五加叶提取物后,4种待测成分在体内吸收均较迅速,10min时,均可在血浆中检测到。从药-时曲线观察到在2h时,RT和HS有缓慢上升的趋势,可能是肝肠循环的原因。随着刺五加药用价值的开发,刺五加野生资源严重不足,已被国家列为三级保护渐危品种。开发药用新资源“刺五加叶”的新药效对于保护野生刺五加资源、促进刺五加药用资源的可持续性和综合开发利用具有重大意义。并通过本文对刺五加叶成分系统的分析,为刺五加叶的常规质量控制及刺五加叶的进一步的药效物质基础研究提供依据。
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