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冬虫夏草是一种名贵的中药,资源短缺,人工虫草菌丝是其重要的替代品。为了更好地利用发酵虫草资源,本论文对CS-4发酵虫草菌丝挥发油的化学成分及药理活性进行了研究。 首先采用SDE同时蒸馏萃取法提取CS-4发酵虫草菌丝体中的挥发油,建立了CS-4发酵虫草菌丝及其制剂金水宝胶囊中挥发油的GC-MS分析方法,并对多批CS-4发酵虫草菌丝和金水宝胶囊进行了测定。通过NIST11谱库检索、保留指数对照等多种方式,鉴定出其中的64种化学成分,并首次在CS-4发酵虫草菌丝体挥发油中发现了马索亚内酯,该化合物是CS-4发酵虫草菌丝体挥发油中的主要成分,面积百分含量为74%-78%。同时,利用SDE同时蒸馏萃取结合GC-MS分析,分别对百令胶囊、至灵胶囊、宁心宝胶囊和心肝宝胶囊的挥发油进行测定,结果表明,4种胶囊中的挥发油含量均远低于CS-4发酵虫草菌丝及金水宝胶囊,脂肪酸是其主要的挥发油成分。结合化学计量学对不同发酵虫草菌丝的GC-MS色谱图进行多元统计处理,由PLS-DA结果图可见这种方法可以直观地反映不同发酵虫草产品挥发油的差异并用于产品鉴别。 其次建立了CS-4发酵虫草菌丝和金水宝胶囊中马索亚内酯的高效液相色谱定量测定方法。CS-4发酵虫草菌丝或金水宝胶囊内容物以80%的甲醇超声提取,以C18色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(50∶50),等度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长206nm。马索亚内酯进样浓度在1.26-1260μg/mL范围内具有良好的线性关系,高中低三个添加水平下的平均回收率分别为102.1%、100.0%、100.6%,RSD分别为0.7%、0.6%、0.5%,26批Cs-4发酵虫草菌丝中马索亚内酯的含量在2.98-5.39mg/g之间,平均值为3.41mg/g,RSD为13.3%。3批金水宝胶囊中马索亚内酯的含量在0.99-1.35mg/每粒之间,含量较高且稳定。该方法操作简便、定量准确,适用于CS-4发酵虫草菌丝和金水宝胶囊中马索亚内酯的含量测定。 最后,本论文以CS-4发酵虫草菌丝挥发油和其特征指标成分—马索亚内酯为研究对象,对其体外的抗肿瘤活性进行了初步探索,两者均对人宫颈癌细胞Hela、人肺癌细胞A549、人肝癌HepG2细胞具有明显的生长抑制作用,且呈药物浓度相关性,半抑制浓度均低于50μg/mL。马索亚内酯是CS-4发酵虫草菌丝挥发油抗肿瘤活性的物质基础。